基础论著
泛素特异性蛋白酶25在颞叶癫痫大鼠颞叶皮质中表达变化的实验研究
中华神经外科杂志, 2020,36(3) : 281-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn112050-20191105-00476
摘要
目的

探讨海人酸点燃杏仁核大鼠颞叶癫痫模型颞叶皮质中泛素特异性蛋白酶25(USP25)的表达情况。

方法

将52只SD雄性大鼠按随机数字表法分为癫痫模型组(共39只)和假手术对照组(简称对照组,13只)。癫痫模型组建立海人酸点燃杏仁核大鼠颞叶癫痫模型,再按构建成功的时间分为3组(构建成功1 d为急性期组、构建成功7 d为潜伏期组、构建成功30 d为慢性期组,每组各13只),在观察结束时取材。对照组在杏仁核注入生理盐水,与癫痫模型组伴随取材。免疫组织化学染色及免疫荧光双标法检测USP25在颞叶皮质中的表达及与神经元(NeuN)和星形胶质细胞(GFAP)的共定位情况;实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测USP25在颞叶皮质中的表达变化。

结果

在注药侧颞叶皮质中,癫痫模型组USP25与NeuN的共定位阳性细胞在癫痫后期增加,USP25 mRNA及蛋白水平在癫痫发作不同时期的表达差异均有统计学意义(F值分别为25.48、7.68,均P<0.05)。与对照组(mRNA:1.00±0.36;蛋白:1.00±0.46)比较,潜伏期组(mRNA:10.80±4.82;蛋白:1.88±0.32)和慢性期组(mRNA:12.97±4.48;蛋白:1.92±0.26)的表达水平显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在未注药侧皮质中,USP25 mRNA及蛋白水平在癫痫发作不同时期的表达差异也均有统计学意义(F值分别为86.86、6.65,均P<0.05)。

结论

颞叶皮质中USP25的表达在癫痫大鼠潜伏期后增加,提示去泛素化通路参与颞叶癫痫的慢性病理过程。

引用本文: 陈烨, 王玉娇, 师忠芳, 等.  泛素特异性蛋白酶25在颞叶癫痫大鼠颞叶皮质中表达变化的实验研究 [J] . 中华神经外科杂志, 2020, 36(3) : 281-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn112050-20191105-00476.
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目前认为,难治性癫痫主要为颞叶癫痫,前颞叶切除术是最常见的手术方式,术后约有65%的癫痫患者可被治愈[1]。对癫痫灶病理变化的研究为临床了解癫痫的发生发展提供了重要线索。组织学研究发现,手术切除的颞叶皮质主要病理变化为神经元丢失及星形胶质细胞增生[2]。研究表明,泛素蛋白酶体途径介导的蛋白水解过程参与了神经突触可塑性及功能调节,被认为是调控神经系统功能的一种分子机制,并参与阿尔茨海默病、亨廷顿症、帕金森病等疾病的发生发展[3]。阿尔茨海默病动物模型研究显示,泛素蛋白酶体途径异常导致的突触功能紊乱及神经元内异常蛋白沉淀是阿尔茨海默病病理改变的原因[4]。泛素蛋白酶体途径中的去泛素化酶在神经退行性疾病中发挥着降解短寿命调节蛋白和异常蛋白的重要功能[3]。泛素特异性蛋白酶25(ubiquitin-specific protease 25,USP25)是一种位于21q11.2的泛素特异性蛋白酶,属于5种去泛素化酶家族之一,在许多细胞通路中,USP25通过26S蛋白酶体参与蛋白的降解过程[5]。有研究提示,USP25可能与阿尔茨海默病[6]和帕金森病[7]相关。但目前,鲜见去泛素化途径在癫痫中变化及作用的报道,因此,本研究建立海人酸(kainic acid,KA)点燃杏仁核大鼠颞叶癫痫模型,研究USP25在癫痫大鼠颞叶皮质的表达情况及其在癫痫不同时期的变化,以探讨USP25在颞叶癫痫中的作用及意义。

 
 
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