论著
Bit1蛋白对胰腺癌细胞恶性生物学行为的影响及其临床指标的相关性分析
中华外科杂志, 2017,55(11) : 857-862. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5815.2017.11.008
摘要
目的

探讨Bit1蛋白对胰腺癌细胞运动、迁移、侵袭等恶性表型的影响及临床相关指标的相关性分析。

方法

通过real-time PCR和免疫印迹法验证6株胰腺癌细胞株中Bit1蛋白的表达情况,分别挑选Bit1表达量最高和最低的胰腺癌细胞株作为细胞功能调节的工具细胞。采用polyHEMA铺皿实验构建胰腺癌细胞悬浮培养的模型,检测Bit1对胰腺癌细胞失巢凋亡的影响;利用Transwell实验观察Bit1对胰腺癌细胞运动迁移和侵袭能力的影响;通过免疫印迹法和共焦显微镜下观察Bit1对胰腺癌细胞上皮间质转化(EMT)表型过程相关分子标志物的影响;制作术后胰腺癌患者癌和癌旁组织微阵列并进行免疫组化染色,分析Bit1与胰腺癌患者临床病理特征的相关性。

结果

Bit1在胰腺癌细胞株PANC1中的表达量(基因:3.13±0.40,蛋白:1.77±1.00)最高,在Mia paca2中的表达量(基因:1.00±0.35,蛋白:0.23±0.45)最低。失巢凋亡检测结果显示,Bit1过表达可促进悬浮培养胰腺癌细胞Mia paca2的凋亡,而在PANC1细胞中敲减Bit1之后失巢凋亡受到抑制;Transwell实验检测结果提示,Bit1敲减之后胰腺癌细胞的运动、迁移及侵袭能力明显大于对照组(P<0.05),而Bit1过表达之后可受到明显抑制(P<0.05);免疫印迹法和共焦显微镜下观察证实Bit1敲减之后EMT过程的间质表型N-cadherin及Vimentin的表达上调,而上皮表型E-cadherin下调,相关转录因子β-catenin的表达也是上调的,Bit1过表达之后结果相反;Bit1的差异性表达与胰腺癌患者肿瘤的神经浸润相关(P<0.05)。

结论

Bit1可负向调控胰腺癌细胞的失巢凋亡发生及其运动迁移及侵袭能力,其对胰腺癌细胞恶性生物学行为的调控作用与EMT过程密切相关。胰腺癌患者肿瘤中Bit1蛋白表达与肿瘤的神经浸润存在相关性。

引用本文: 黄帅, 袁达, 郭俊超, 等.  Bit1蛋白对胰腺癌细胞恶性生物学行为的影响及其临床指标的相关性分析 [J] . 中华外科杂志, 2017, 55(11) : 857-862. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5815.2017.11.008.
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胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤,其5年生存率不足8%,居所有恶性肿瘤致死原因的第4位[1]。目前研究结果表明,肿瘤的侵袭转移是影响胰腺癌患者预后的主要因素[2]。因此,研究胰腺癌侵袭转移的相关机制,对于提高胰腺癌患者的生存时间和生活质量,具有十分重要的现实意义。目前研究结果多显示,实体恶性肿瘤细胞脱落形成单个循环肿瘤细胞是其转移的前提和基础,而失巢凋亡抵抗是形成单个循环肿瘤细胞的重要前提[3]。Bit1为Bcl-2抑制蛋白,已被证实在人体其他恶性肿瘤的侵袭转移过程中有重要调节作用[4,5,6,7]。因此,有必要探讨Bit1对胰腺癌细胞的生物学调控作用及其潜在临床应用价值。

 
 
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