探讨癌易感性候选基因19（CASC19）调控微小RNA-449b-5p（miR-449b-5p）的表达后对子宫颈癌细胞增殖、凋亡和辐射敏感性的影响。
（1）培养子宫颈癌细胞系HeLa细胞，予不同剂量（分别为0、2、4、6、8 Gy）的X线照射，实时荧光定量PCR技术检测HeLa细胞中CASC19 mRNA和miR-449b-5p的表达水平。（2）不同条件处理后HeLa细胞增殖、凋亡、辐射敏感性及其相关蛋白表达的检测，其中，不同处理条件包括沉默CASC19表达、过度表达miR-449b-5p、下调miR-449b-5p并沉默CASC19表达，相关蛋白包括细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase-3）和组蛋白变异体H2AX（γ-H2AX）；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，细胞克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性（以存活分数表示）。（3）采用双荧光素酶报告基因实验（结果以荧光素酶活性表示）和实时荧光定量PCR技术验证CASC19和miR-449b-5p之间的靶向调控关系。
（1）随着X线照射剂量（0、2、4、6、8 Gy）的增加，HeLa细胞中CASC19 mRNA的表达水平逐渐升高（F=502.681，P=0.000），miR-449b-5p的表达水平逐渐降低（F=202.936，P=0.000）。（2）沉默CASC19表达、过度表达miR-449b-5p后，HeLa细胞的存活率显著降低（P<0.05），凋亡率显著升高（P<0.05），存活分数显著降低（P<0.05），cyclin D1蛋白的表达水平显著降低（P<0.05），cleaved-caspase-3和γ-H2AX蛋白的表达水平显著升高（P<0.05）；下调miR-449b-5p并沉默CASC19表达后，HeLa细胞的存活率显著升高（P<0.05），凋亡率显著降低（P<0.05），存活分数显著升高（P<0.05），cyclin D1、γ-H2AX蛋白的表达水平显著升高（P<0.05），cleaved-caspase-3的表达水平显著降低（P<0.05）。（3）与对照比较，过度表达miR-449b-5p可显著降低CASC19基因野生型HeLa细胞的荧光素酶活性（分别为1.00±0.09、0.37±0.05，P<0.01），而对CASC19基因突变型HeLa细胞的荧光素酶活性无显著影响（分别为0.92±0.07、0.94±0.05，P>0.05）。与对照比较，沉默CASC19表达后HeLa细胞中miR-449b-5p的表达水平显著升高（分别为1.00±0.12、4.84±0.49，P<0.05），过度表达CASC19后HeLa细胞中miR-449b-5p的表达水平显著降低（分别为1.00±0.09、0.38±0.04，P<0.05）。
HeLa细胞中CASC19可负调控miR-449b-5p的表达，下调miR-449b-5p表达可部分逆转沉默CASC19对HeLa细胞增殖、凋亡及辐射敏感性的影响。
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子宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性生命健康。子宫颈癌的治疗主要包括早期患者的根治性手术治疗和晚期患者的放疗，但是晚期患者的治疗效果不佳。研究显示，约有一半的晚期患者对放疗不敏感，易发生肿瘤转移。放疗抵抗是晚期子宫颈癌患者治疗失败的主要原因之一。目前，产生放疗抵抗的机制仍不清楚，探讨影响子宫颈癌细胞辐射敏感性的分子机制有助于提高放疗的疗效。长链非编码RNA（long non- coding RNA，lncRNA）在真核生物中广泛存在，其长度超过200个核苷酸。研究显示，多种lncRNA参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等恶性生物学行为，其在调控放疗抵抗方面的作用是当前的研究热点之一。癌易感性候选基因19（CASC19）是1种lncRNA，在多种肿瘤组织中表达异常，参与肿瘤的发生、发展。如CASC19在结直肠癌组织中的表达升高，其高表达与肿瘤转移密切相关，沉默CASC19的表达可抑制结直肠癌细胞的迁移能力；CASC19可影响结肠癌细胞对化疗药物的耐药性。为探讨CASC19对子宫颈癌细胞增殖、凋亡及辐射敏感性的影响，本研究在沉默CASC19 mRNA表达、过度表达微小RNA-449b-5p（miR-449b-5p）、下调miR-449b-5p并沉默CASC19表达后，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、流式细胞仪、细胞克隆形成实验分别检测HeLa细胞增殖、凋亡、辐射敏感性的变化，并探讨其可能的作用机制，以期为子宫颈癌的靶向治疗提供新靶点。
