论著
基于二代测序的不同分化阶段晶状体转录组分析
中华眼科杂志, 2020,56(5) : 356-363. DOI: 10.3760/cma.j.cn112142-20200222-00095
摘要
目的

了解分化中晶状体的转录谱,包括mRNA、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)。

方法

实验研究。提取人源性分化晶状体RNA并纯化。然后使用Illumina HiSeq 2500对16、23、25周晶状体总RNA样本进行测序,并使用生物信息学工具进行分析,筛选出最高表达和差异表达的mRNA和lncRNA;用维恩图分析3个时期晶状体的重叠基因表达情况;分析晶状体特异性基因的表达趋势,并用实时荧光定量PCR验证。

结果

在16、23、25周晶状体中分别获得67 518 311、99 440 160和67 262 320条映射序列。基因重叠表达分析显示,前1 000个高表达mRNA、前300个高表达lncRNA和前100个高表达circRNA中分别有740、170、69个在16、23、25周晶状体中同时表达。晶状体特异性基因表达分析显示,晶状体蛋白(CRY)AA、CRYGA、CRYGB、CRYGC、CRYGD、CRYGEP和CRYGS基因表达随晶状体分化时间上调,缝隙连接(GJ)蛋白GJA3和GJA8基因表达随晶状体分化时间下调。

结论

晶状体转录组表达谱显示不同分化阶段晶状体的高表达mRNA、lncRNA和circRNA中重叠表达者占半数以上,且均高表达晶状体特异性蛋白基因,如CRY、GJ蛋白基因等。(中华眼科杂志,202056356-363

引用本文: 张丽芳, 秦祯蔚, 卢冰, 等.  基于二代测序的不同分化阶段晶状体转录组分析 [J] . 中华眼科杂志, 2020, 56(5) : 356-363. DOI: 10.3760/cma.j.cn112142-20200222-00095.
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晶状体是一种无血管的透明组织,其起源于表皮外胚层,逐步形成晶状体板、晶状体泡,后者由单层细胞组成,其前壁细胞分化为晶状体上皮细胞,而后不断增长形成次级晶状体纤维;后壁细胞形成初级晶状体纤维,并逐渐退化形成晶状体核。这个过程伴随着细胞伸长、晶状体蛋白合成和细胞器程序化降解。晶状体发育障碍可导致多种晶状体疾病,如球形晶状体、先天性无晶状体眼、先天性晶状体脱位、先天性白内障等。先天性白内障是全球儿童失明的首要原因,由胚胎期的基因突变、感染和代谢紊乱等因素引起。因此,了解晶状体发育的分子机制对于晶状体疾病的早期干预和治疗具有重要意义。

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