检测艰难梭菌毒素B(TcdB)对结肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响,研究其引起细胞凋亡的相关机制。
采用不同浓度的TcdB处理SW480细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;用流式细胞术检测细胞的凋亡及线粒体膜电位变化情况。
TcdB显著抑制了结肠癌SW480细胞的增殖,作用48 h后的抑制率为46.36%,呈一定的时间-浓度相关性;流式细胞仪检测结果表明,浓度为800 ng/ml的TcdB作用48 h,SW480细胞凋亡率为20.83%,呈一定的时间-浓度相关性。
艰难梭菌毒素B能够抑制结肠癌SW480细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与启动线粒体凋亡途径有关。
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艰难梭菌(Clostridium difficile)属厌氧梭状芽孢梭菌,是医院内感染性腹泻的主要病原之一。临床上,由于抗生素的大量使用,人体肠道微生态平衡被破坏,艰难梭菌乘机大量繁殖产生毒素,导致艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)。艰难梭菌产生的毒素可达6种,主要为A、B毒素,A毒素(Clostridium difficile toxin A,TcdA)为肠毒素,B毒素(Clostridium difficile toxin B,TcdB)为细胞毒素,此外还产生一种二元毒素,TcdB的细胞毒性约为TcdA的100倍。研究结果表明,人的结肠对TcdB的敏感性大约是TcdA的10倍,这表明TcdB在艰难梭菌相关性腹泻的发病机制中可能比TcdA更重要[1]。面对国内外CDI的新特点和国内潜在暴发流行的趋势[2],探讨TcdB在感染中的致病机制尤为重要。本研究利用TcdB处理结肠癌细胞SW480,观察并检测细胞增殖、凋亡情况,探索其诱导结肠癌细胞凋亡的机制。