技术方法
可诱导性表达多种流感病毒HA蛋白稳定细胞系新型构建方法的研究
中华实验和临床病毒学杂志, 2017,31(2) : 157-161. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.02.016
摘要
目的

建立一条创新性的技术路线快速构建可诱导性表达多种甲型流感病毒(IAV)HA蛋白的细胞系。

方法

将多种IAV的HA蛋白基因连接到含有PiggyBac转座子位点的Cumate诱导表达系统中,与PiggyBac转座酶质粒共转染HEK293A细胞系,利用嘌呤霉素筛选阳性细胞,并用Cumate诱导相应病毒蛋白表达。

结果

流式细胞仪检测及Western blot检测结果均表明,加入诱导剂Cumate后,获取的细胞系中绝大部分细胞均开始表达相应的病毒蛋白。

结论

利用PiggyBac转座子可以高效率的构建诱导性表达IVA HA蛋白的细胞系。

引用本文: 张艳晶, 韩连连, 郭丽, 等.  可诱导性表达多种流感病毒HA蛋白稳定细胞系新型构建方法的研究 [J] . 中华实验和临床病毒学杂志, 2017, 31(2) : 157-161. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.02.016.
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流感病毒是流行性感冒(简称流感)的病原体,由于其抗原性易发生变异,并可导致传染性极强的呼吸系统疾病,流感病毒曾多次引起世界性大流行。近年来,禽流感病毒H5N1和H7N9引起了数百例人感染[1],相对于季节性流感,禽流感病毒患者死亡率明显增高(分别达60%和36%)[2,3,4]。因此,迫切需要对禽流感致病机理,特别是包括HA蛋白在内的病毒蛋白与致病性的关系[5],进行深入研究。

 
 
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