探讨缺氧对人绒毛外滋养细胞微小RNA（microRNA，miRNA）–155表达的影响及其对滋养细胞迁移的影响。
（1）采用100 μmol/L氯化钴（cobalt chloride，CoCl2）诱导HTR–8/SVneo细胞缺氧，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA–155的表达，蛋白质印迹技术检测JunB和FosB蛋白的表达，划痕实验评估细胞迁移能力。（2）采用SP600125和PDTC分别抑制激活蛋白–1（active protein–1，AP–1）和/或核因子（nuclear factor）–κB通路，实时定量聚合酶链反应技术检测miRNA–155的表达变化。（3）HTR–8/SVneo细胞瞬时转染pEGFP–miRNA–155、pEGFP–C1和pGL3–pro–cyclin D1 3'UTR，荧光素酶报告基因系统检测miRNA–155对cyclin D1 3'非编码区的调控。（4）HTR–8/SVneo细胞瞬时转染pEGFP–miRNA–155和/或pFLAG–CMV–cyclin D1以过表达miRNA–155和/或cyclin D1，划痕实验评估细胞迁移能力的改变。采用两独立样本t检验，方差分析及LSD检验进行统计学分析。
（1）100 μmol/L CoCl2培养HTR–8/SVneo细胞24和48 h，miRNA–155的相对表达量分别是0 h的（1.40±0.28）倍（t=3.302，P=0.030）和（1.74±0.14）倍（t=8.578，P=0.001），随CoCl2（100 μmol/L）作用于HTR–8/SVneo细胞的时间延长，JunB和FosB蛋白表达均升高。细胞迁移率在培养12、24和48 h较0 μmol/L CoCl2时下降，尤以48 h降低明显[（52.98±3.77）%与（64.68±3.92）%，t=5.259，P=0.000]。（2）抑制AP–1亚组、抑制NF–κB亚组及同时抑制AP–1和NF–κB亚组miRNA–155的相对表达量分别降低至无抑制情况下的（50.45±3.53）%、（47.18±2.14）%和（66.79±3.92）%（t值分别为3.630、4.100和3.392，P值均<0.05）。（3）过表达miRNA–155亚组的cyclin D1 3'非编码区荧光素酶活性较无过表达时降低（t=46.682，P=0.000）。（4）过表达miRNA–155亚组的HTR–8/SVneo细胞迁移率较无过表达时明显降低[48 h，（33.31±6.19）%与（47.20±2.82）%，LSD检验，P<0.05]，而同时过表达miRNA–155和cyclin D1亚组的HTR–8/SVneo细胞迁移率较单纯过表达miRNA–155亚组明显升高[48 h，（43.04±1.44）%与（33.31±6.19）%，LSD检验，P=0.002]。
缺氧通过激活HTR–8/SVneo细胞中AP–1和NF–κB通路而引起miRNA–155的表达升高，miRNA–155表达升高可以下调细胞周期蛋白cyclin D1，进而抑制滋养细胞迁移。
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妊娠早期的胎盘发生是在相对缺氧的微环境中进行的。缺氧对胎盘滋养细胞生物学行为具有重要的调节作用。缺氧条件下滋养细胞侵袭障碍可引起胎盘浅着床、子宫螺旋动脉重铸障碍，进一步加重胎盘缺血缺氧，从而导致病理妊娠的发生，如子痫前期等。子痫前期是常见且严重的妊娠并发症，主要表现为妊娠20周后出现的高血压、蛋白尿，是我国孕产妇死亡的第二大原因。妊娠期胎盘局部慢性缺氧参与的胎盘浅着床、螺旋动脉重铸障碍是子痫前期的主要病理特点，其分子生物学机制仍不清楚。微小RNA（microRNA，miRNA）是单链小分子RNA，通过与靶基因mRNA的3'非编码区（3' untranslated region，3'UTR）结合，通过促进靶基因mRNA降解或抑制转录后翻译而调控靶基因的表达，进而调节细胞的基本生理过程。miRNA在子痫前期的发生、发展中起重要作用。miRNA–155靶向调控多个基因的表达，参与滋养细胞迁移、增殖等介导的胎盘发育，且在重度子痫前期患者胎盘中的相对表达量较正常妊娠者明显升高。氯化钴（cobalt chloride，CoCl2）是一种化学缺氧剂，本研究利用CoCl2诱导人绒毛外滋养细胞化学缺氧，探讨缺氧条件下miRNA–155表达上调的可能机制及其对细胞迁移的影响。
