Analysis of factors influencing the mobilization and collection of autologous peripheral blood stem cells

Zhao Zhiqiang; Wang Lieyang; Liu Xiaolan; Wang Jiangtao; Guan Tao; Zhang Zong; Luo Yanhong; Su Liping

doi:10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2019.09.005

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• 论著 •

自体外周血干细胞动员及采集效果影响因素分析

白血病·淋巴瘤, 2019,28(9) : 533-537. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2019.09.005

摘要

目的

探讨自体外周血干细胞动员、采集效果的影响因素。

方法

收集2012年4月至2017年3月在山西省肿瘤医院行自体外周血造血干细胞动员、采集的62例患者临床资料。分析患者年龄、性别、疾病类型、化疗周期、疾病状态、不同方案和患者采集前1天外周血CD34⁺细胞对CD34⁺细胞数和CD34⁺细胞采集成功率的影响。计量资料比较采用单因素方差分析和t检验；计数资料比较采用χ²检验或Fisher确切概率法；多因素分析采用多重线性回归分析。

结果

化疗>6个周期与≤6个周期患者间采集物中CD34⁺细胞数差异有统计学意义[（2.6±1.3）×10⁶/kg比（5.8±2.2）×10⁶/kg；t=5.221，P<0.01]，CD34⁺细胞采集成功率差异有统计学意义[68.8%（11/16）比97.8%（45/46）；χ²=8.396，P=0.004]；男性患者与女性患者相比，采集物中CD34⁺细胞数差异无统计学意义[（5.4±2.2）×10⁶/kg比（4.5±2.8）×10⁶/kg；t=1.302，P=0.198]，但男性采集成功率高于女性[97.6%（40/41）比76.2%（16/21）]，差异有统计意义（χ²=5.017，P=0.025）；采集前1天外周血CD34⁺细胞数≥10个/μl患者采集成功率高于<10个/μl患者[97.9%（47/48）比64.3%（9/14）]，差异有统计学意义（χ²=10.668，P=0.001）；而不同年龄、疾病类型、疾病状态及不同动员方案的采集物中CD34⁺细胞数及采集成功率差异均无统计学意义（均P>0.05）。对上述有统计学意义的影响因素进行多因素分析显示，动员前化疗≤6个周期是干细胞采集的有利因素（b=-3.435，P<0.01）。

结论

自体外周血干细胞的有效动员、采集效果与动员前接受的化疗周期数有关，化疗应尽量≤6个周期，达部分缓解及以上时尽早行干细胞动员、采集，并在动员过程中监测外周血CD34⁺细胞数。在外周血CD34⁺细胞数>10个/μl时于次日开始采集可能会获得较好的采集效果，从而提高采集成功率。

引用本文: 赵志强, 王列样, 刘小兰, 等. 自体外周血干细胞动员及采集效果影响因素分析 [J] . 白血病·淋巴瘤,2019,28 (9): 533-537. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2019.09.005

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自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）已成为血液系统恶性疾病及某些化疗敏感肿瘤的重要治疗手段。而采集足够数量的外周血干细胞是移植获得成功的关键因素。我们回顾性分析了进行自体外周血造血干细胞动员、采集患者的临床资料，探讨自体外周血干细胞动员、采集效果的影响因素，以进一步提高采集效率，避免对采集不利的影响因素，现报道如下。

1　资料与方法

1.1　临床资料

收集2012年4月至2017年3月在山西省肿瘤医院进行自体外周血造血干细胞动员、采集的患者62例，其中男性41例，女性21例，中位年龄34岁（12~60岁）。原发病为非霍奇金淋巴瘤（NHL）24例（38.7%），霍奇金淋巴瘤（HL）5例（8.1%），急性髓系白血病（AML）15例（24.2%），急性淋巴细胞白血病（ALL）9例（14.5%），多发性骨髓瘤（MM）9例（14.5%）。造血干细胞动员前有2例NHL及1例HL为部分缓解（PR），3例MM为非常好的部分缓解（VGPR），2例为PR，其他患者均处于完全缓解（CR）。动员前化疗≤6个周期46例（74.2%），>6个周期16例（25.8%）。采集失败6例，其中3例为NHL，2例为AML，1例为MM。所有患者均无放射治疗史。本研究符合2013年修订的《赫尔辛基宣言》的要求，所有患者均知情同意。

1.2　动员方案

所有患者均采用化疗联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员方案。NHL及HL患者采用原化疗有效方案，其中采用ICE方案（异环磷酰胺、卡铂、依托泊苷）12例，DHAP方案（地塞米松、顺铂、阿糖胞苷）8例，BEACOPP方案（博莱霉素、依托泊苷、多柔比星、环磷酰胺、长春新碱、甲基苄肼和泼尼松）3例，大剂量环磷酰胺12例，大剂量阿糖胞苷27例；AML及ALL患者采用中大剂量阿糖胞苷为主方案；MM患者采用大剂量环磷酰胺（2~4 g/m²，2 d内输注）为主方案。在患者化疗后外周血白细胞计数（WBC）下降至低谷并开始回升时，给予G-CSF（日本协和发酵麒麟株式会社）10 μg·kg^-1·d^-1皮下注射，直到采集结束。动员后患者粒细胞缺乏期有感染发生时予抗感染治疗。在血小板计数<20×10⁹/L时输注单采血小板。

1.3　血细胞计数

所有患者从干细胞动员开始至采集结束，每天于G-CSF动员后2 h应用流式细胞仪（美国贝克曼库尔特FC500单激光五色）检测外周血CD34⁺细胞数。同时进行外周血WBC、单个核细胞计数（MNC），干细胞采集的同日对采集物行WBC、MNC及CD34⁺细胞计数。

1.4　外周血造血干细胞采集

应用G-CSF第4天或第5天，采用Cobe Spectra血细胞分离机（美国泰尔茂比司特公司）干细胞程序采集干细胞，采集流速45~50 ml/min，循环血量10~12 L（2~2.5个循环）。应用枸橼酸钠抗凝，抗凝剂量为1/12循环血量，采集过程中常规口服葡萄糖酸钙预防低钙血症，如出现肌肉痉挛、指趾麻木等低钙表现时给予静脉推注葡萄糖酸钙。

1.5　采集次数及结果判定

根据获得的CD34⁺细胞数量决定采集次数。采集结果判定标准^[1]：获得的CD34⁺细胞数≥2×10⁶/kg为采集成功；获得的CD34⁺细胞数≥5×10⁶/kg为采集优良；获得的CD34⁺细胞数<2×10⁶/kg为采集失败。

1.6　研究方法

分析患者年龄、性别、疾病类型、化疗周期数、疾病状态、动员方案等对采集结果的影响，以及采集前1天外周血CD34⁺细胞数对采集结果的预测意义。

1.7　统计学方法

采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。计量资料符合正态分布，采用均数±标准差（±s）表示，利用独立样本t检验和单因素方差分析进行组间比较；计数资料组间比较采用χ²检验或Fisher确切概率法；多因素分析采用多重线性回归分析。检验水准α=0.05。

2　结果

2.1　造血干细胞采集情况

62例患者共采集136例次，获得MNC（5.7±1.1）×10⁸/kg，CD34⁺细胞（2.2±1.2）×10⁶/kg。首次采集成功56例（90.3%），其中采集优良19例（30.6%），动员、采集失败6例，其中NHL 3例，AML 2例，MM 1例。经二次动员、采集，6例失败患者均采集成功。

2.2　影响造血干细胞采集结果的单因素分析

单因素分析结果见表1、表2。男性患者CD34⁺细胞采集成功率高于女性，差异有统计学意义（P<0.05）；化疗≤6个周期患者采集物中CD34⁺细胞数和采集成功率高于化疗>6个周期患者，差异均有统计学意义（P<0.01）；采集前1天外周血CD34⁺细胞≥10个/μl患者采集成功率高于<10个/μl患者，差异有统计学意义（P=0.001）。

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表1

影响自体外周血造血干细胞动员、采集患者CD34⁺细胞采集数量的单因素分析（×10⁶/kg，±s）

表1

影响自体外周血造血干细胞动员、采集患者CD34⁺细胞采集数量的单因素分析（×10⁶/kg，±s）

组别		例数	CD34⁺细胞数	统计量值	P值
年龄（岁）
	≤45	47	5.1±2.4	t=0.143	0.887
	>45	15	5.0±2.7	t=0.143	0.887
性别
	男	41	5.4±2.2	t=1.302	0.198
	女	21	4.5±2.8	t=1.302	0.198
疾病类型
	NHL	24	5.1±2.4	F=0.422	0.752
	HL	5	5.5±2.3
	MM	9	4.4±3.1
	AML	15	4.8±2.4
	ALL	9	5.8±2.6
化疗周期（个）
	≤6	46	5.8±2.2	t=5.221	<0.01
	>6	16	2.6±1.3	t=5.221	<0.01
疾病状态
	CR	54	5.2±2.4	t=1.449	0.152
	PR	8	3.9±2.7	t=1.449	0.152
不同方案
	ICE	12	4.6±2.9	F=0.719	0.583
	DHAP	8	4.9±2.3
	BEACOPP	3	6.9±1.5
	大剂量环磷酰胺	12	5.6±2.5
	大剂量阿糖胞苷	27	4.9±2.4

注：NHL为非霍奇金淋巴瘤；HL为霍奇金淋巴瘤；MM为多发性骨髓瘤；AML为急性髓系白血病；ALL为急性淋巴细胞白血病；CR为完全缓解；PR为部分缓解；ICE方案为异环磷酰胺、卡铂、依托泊苷；DHAP方案为地塞米松、顺铂、阿糖胞苷；BEACOPP方案为博莱霉素、依托泊苷、多柔比星、环磷酰胺、长春新碱、甲基苄肼和泼尼松

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表2

影响自体外周血造血干细胞动员、采集患者CD34⁺细胞采集成功的单因素分析[例（%）]

表2

影响自体外周血造血干细胞动员、采集患者CD34⁺细胞采集成功的单因素分析[例（%）]

组别		例数	采集成功	χ²值	P值
年龄（岁）
	≤45	47	43(91.5)	0.008	>0.05
	>45	15	13(86.7)	0.008	>0.05
性别
	男	41	40(97.6)	5.017	0.025
	女	21	16(76.2)	5.017	0.025
疾病类型
	NHL	24	21(87.5)	1.575	0.922
	HL	5	5(100.0)
	MM	9	8(88.9)
	AML	15	13(86.7)
	ALL	9	9(100.0)
化疗周期（个）
	≤6	46	45(97.8)	8.396	0.004
	>6	16	11(68.8)	8.396	0.004
疾病状态
	CR	54	49(90.7)	-	0.580
	PR	8	7(87.5)	-	0.580
不同方案
	ICE	12	11(91.7)	2.623	0.626
	DHAP	8	6(75.0)
	BEACOPP	3	3(100.0)
	大剂量环磷酰胺	12	11(91.7)
	大剂量阿糖胞苷	27	25(92.6)
采集前1天外周血
CD34⁺细胞（个/μl）
	≥10	48	47(97.9)	10.688	0.001
	<10	14	9(94.3)	10.688	0.001

2.3　影响造血干细胞采集结果的多因素分析

以干细胞采集结果中CD34⁺细胞数为因变量，单因素分析有统计学意义的因素为协变量，采用多重线性回归分析，结果显示动员前化疗周期数对干细胞采集结果有影响（b=-3.435，P<0.01）。

3　讨论

APBSCT是现代医学发展的一个重要里程碑，已广泛应用于恶性血液系统疾病及某些化疗敏感肿瘤的治疗。而通过外周血干细胞动员及采集获得足够数量的CD34⁺细胞是移植成功的关键。一般认为CD34⁺细胞数≥2×10⁶/kg是移植成功的阈值^[1]。但是仍有10%~30%患者采集失败，达不到阈值^[2]。从动员到采集的环节众多，再加上许多个体因素，如年龄、治疗史（尤其是烷化剂）、不同的动员方案、疾病状态等，均影响干细胞采集效果，目前国内外尚无关于干细胞采集的规范及流程。关于干细胞采集的影响因素有较多报道，但结果不尽相同。

自体干细胞移植一般年龄限制为60岁以下，对于体能状态好者可放宽到65岁，而异基因干细胞移植一般年龄限制为45岁，故本研究以45岁为界限，比较>45岁及≤45岁患者自体干细胞采集量是否有差异。因患者年龄越大，骨髓储备功能越差，CD34⁺细胞采集量越少，而对于60岁以上患者，一般需要2次动员才能达到采集阈值^[3,4]。

本研究结果发现，化疗>6个周期患者采集物中CD34⁺细胞数及采集成功率均低于化疗≤6个周期患者，而男性与女性患者采集物中CD34⁺细胞数并无明显差异，但男性采集成功率优于女性。不同年龄、疾病类型、疾病状态、动员方案患者干细胞动员采集效果差异无统计学意义。对上述影响因素进行多因素分析显示，仅动员前化疗>6个周期是影响干细胞采集的不利因素。对于动员前化疗周期数对采集结果的不利影响多项研究结果一致^[4,5,6]，原因可能与过多的化疗药物累积导致骨髓造血干细胞损伤以及骨髓干细胞贮备能力下降有关。因而对于拟行APBSCT的患者，一旦具备移植条件宜尽早进行，以免多次化疗造成采集失败或不必要的多次采集。而关于年龄、动员方案、疾病类型等对干细胞采集的影响国内外文献报道并不一致^[3,7,8]。本组病例数较少且为单中心研究，得出的结论需继续扩大病例数并进行多中心研究进一步证实。

国内外多篇文献^[9,10,11]报道外周血CD34⁺细胞与采集产物CD34⁺细胞有很强的相关性，因而通过检测外周血CD34⁺细胞可预测采集结果。Rossi等^[12]报道在化疗联合G-CSF动员后，外周血WBC>1×10⁹/L时如外周血CD34⁺细胞低于12.3个/μl是采集失败的独立危险因素。Storch等^[10]提出可在采集前1天检测外周血CD34⁺细胞，如>10个/μl，则第2天如期进行采集，如<10个/μl，则需当天给予强效干细胞动员剂后按期或推迟1 d采集以避免采集失败。因而本研究对采集前1天外周血CD34⁺细胞≥10个/μl的35例患者与<10个/μl的28例患者的采集结果进行了比较，结果显示差异有统计学意义（P<0.05），前者采集成功率高于后者。因而对于拟行自体外周血干细胞动员的患者，化疗应尽量≤6个周期、达PR及以上时尽早行干细胞动员、采集，并在动员过程中监测外周血CD34⁺细胞计数，在外周血CD34⁺细胞数>10个/μl时于次日开始采集可能会获得较好的采集效果，提高采集成功率。

利益冲突

利益冲突　所有作者均声明不存在利益冲突

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贡献者信息

赵志强

山西省肿瘤医院血液科，太原　030013

王列样

山西省肿瘤医院血液科，太原　030013

刘小兰

山西省肿瘤医院血液科实验室，太原　030013

王江涛

山西省肿瘤医院血液科实验室，太原　030013

关涛

山西省肿瘤医院血液科实验室，太原　030013

张宗

山西省肿瘤医院血液科实验室，太原　030013

罗艳虹

山西医科大学统计学教研室，太原　030001

苏丽萍

山西省肿瘤医院血液科，太原　030013

通信作者

王列样

山西省肿瘤医院血液科，太原　030013

Email：wly6822@163.com

关键词

造血干细胞动员; 外周血干细胞移植; 移植，自体;

基金项目

山西省科技攻关项目（20140313011-9）

利益冲突

利益冲突　所有作者均声明不存在利益冲突

历史

出版日期：2019-09-25

收稿日期：2018-11-22

本文编辑

周薇

本文责任校对

李旭清

Original Article

Analysis of factors influencing the mobilization and collection of autologous peripheral blood stem cells

Zhao Zhiqiang, Wang Lieyang, Liu Xiaolan, Wang Jiangtao, Guan Tao, Zhang Zong, Luo Yanhong, Su Liping

Published 2019-09-25

Cite as J Leuk Lymphoma, 2019,28(9): 533-537. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2019.09.005

Abstract

Objective

To explore the factors influencing the mobilization and collection of autologous peripheral blood stem cells.

Methods

The clinical data of 62 patients who received autologous peripheral blood hematopoietic stem cell mobilization in Shanxi Provincial Cancer Hospital from April 2012 to March 2017 were collected. The effects of age, gender, disease type, chemotherapy cycle, disease status, different schemes and the number of CD34⁺ cells in peripheral blood of patients 1 d before collection on the number of CD34⁺ cells and the success rate of CD34⁺ cells collection were analyzed. Measurement data were compared by one-way ANOVA and t test; count data were compared by χ ² test; multivariate analysis was performed by multiple linear regression analysis.

Results

There were statistically significant differences in the number of CD34⁺ cells between patients with chemotherapy >6 cycles and ≤6 cycles [(2.6±1.3)×10⁶/kg vs. (5.8±2.2)×10⁶/kg; t = 5.221, P < 0.01], and the difference in the success rate of CD34⁺ cell collection between the two groups was statistically significant [68.8% (11/16) vs. 97.8% (45/46); χ² = 8.396, P = 0.004]. The difference in the CD34⁺ cells yield was not statistical significance between male and female patients [(5.4±2.2)×10⁶/kg vs. (4.5±2.8)×10⁶/kg; t = 1.302, P = 0.198)], but the collection success rate in males was higher than that in females [97.6% (40/41) vs. 76.2% (16/21)], and the difference was statistically significant (χ ² = 5.017, P = 0.025). The success rate of CD34⁺ cell collection in patients with ≥10/μl CD34⁺ cell in the peripheral blood was significantly higher than that in patients with < 10/μl CD34⁺ cells 1 d before the collection[97.9% (47/48) vs. 64.3% (9/14)], and the difference was statistically significant (χ ² = 10.668, P = 0.001). The differences in CD34⁺ cells yield and collection success rate between patients with different age, disease type, disease status and mobilization regimen were not statistically significant (all P > 0.05). Multi-factor analysis showed that > 6 cycles chemotherapy before mobilization was the adverse factor affecting stem cell collection (b = -3.435, P < 0.01).

Conclusions

The effective mobilization and collection of autologous peripheral blood stem cells are related to the number of chemotherapy cycles before mobilization. The stem cell mobilization and collection should be conducted as soon as possible when the chemotherapy is ≤ 6 cycles and the patient reaches partial remission or above. In addition, peripheral blood CD34⁺ cell count should be monitored during mobilization. When the peripheral blood CD34⁺ cell count is > 10/μl, the collection could be started on the next day to obtain a better collection effect, so as to improve the success rate of collection.

Key words:

Hematopoietic stem cell mobilization; Peripheral blood stem cell transplantation; Transplantation, autologous

Contributor Information

Zhao Zhiqiang

Department of Hematology, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Wang Lieyang

Department of Hematology, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Liu Xiaolan

Department of Hematology Laboratory, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Wang Jiangtao

Department of Hematology Laboratory, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Guan Tao

Department of Hematology Laboratory, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Zhang Zong

Department of Hematology Laboratory, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

Luo Yanhong

Department of Health Statistics, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China

Su Liping

Department of Hematology, Shanxi Provincial Cancer Hospital, Taiyuan 030013, China

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