曹琼洁; 赵晓婷; 敬霞; 王教; 陈晓燕; 闫东升; 瞿佳

doi:10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2018.08.009

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• 论著 •

microRNA-182抑制人角膜上皮细胞增殖和迁移

中华眼视光学与视觉科学杂志, 2018,20(8) : 503-508. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2018.08.009

摘要

目的：

通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182（miR-182）在角膜上皮损伤修复中的功能。

方法：

实验研究。体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠，通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组，对侧眼作为对照组，通过实时定量RT-PCR法检测miR-182在损伤修复过程（损伤后48 h）的表达。体外实验采用脂质体介导的方法将miR-182和随机序列寡核苷酸链转染入人角膜上皮细胞（HCECs），通过细胞增殖实验（MTS法）和细胞克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力，流式细胞术检测细胞周期，细胞划痕实验检测细胞迁移能力。MiR-182表达量及细胞实验各参数2组间比较采用独立样本t检验。

结果：

体内实验中，与对照组相比，实验组中5个样本量的miR-182在角膜上皮损伤修复过程中表达水平显著下调（t=147.6、79.2、136.8、41.3、89.8，均P<0.001）。体外实验中，miR-182组相对细胞数目为（81±5）%，与阴性对照组（100%）相比显著减少（t=6.6，P=0.003），同时miR-182组细胞克隆数明显少于阴性对照组。细胞周期检测结果显示实验组处于G1期细胞数量比例为（49±7）%，明显高于阴性对照组的（35±4）%（t=-3.0，P=0.041）。此外，细胞迁移实验结果显示miR-182组HCECs细胞迁移的距离为（99±12）μm，而阴性对照组的迁移距离为（213±14）μm（t=10.8，P=0.001），迁移速度明显变慢。

结论：

miR-182通过抑制角膜上皮细胞的增殖与迁移，从而对角膜上皮损伤修复起到负调控的作用。

引用本文: 曹琼洁, 赵晓婷, 敬霞, 等. microRNA-182抑制人角膜上皮细胞增殖和迁移 [J] . 中华眼视光学与视觉科学杂志, 2018, 20(8) : 503-508. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2018.08.009.

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角膜上皮位于眼角膜最外层，因其完整性和紧密性对防止病原体渗透进入内层组织起保护屏障作用^[1]。角膜上皮的自我更新是保持角膜透明度和正常视力的重要过程，这种自我更新是在一系列调节细胞增殖、迁移和分化的细胞因子的控制下进行的^[2,3]。临床上，外伤、感染和手术等常易导致角膜上皮损伤，从而影响上皮细胞间的连接，引起细胞膜的通透性和选择性发生变化，从而影响其屏障功能，如果不能顺利修复，外界的致病因子侵害就可能导致组织水肿，改变角膜透明度，严重者引起失明^[4]。

贡献者信息

曹琼洁