探讨MicroRNA-199a-3p（miR-199a-3p）对脉络膜黑色素瘤细胞OCM290增殖的影响及机制。
实验研究。首先采用Real-time PCR技术检测miR-199a-3p在正常的脉络膜黑色素细胞UM96和肿瘤细胞OCM290中的表达情况；其次采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的转染方法，将miR-199a-3p转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞OCM290中过表达作为实验组，将随机序列寡核苷酸链转染入OCM290细胞作为阴性对照组；然后在转染的基础上运用细胞增殖实验法（MTS法）、克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力。流式细胞术检测细胞周期。Western blot法检测与细胞周期相关的信号蛋白如CDK2、CDK4、E2F1等的表达。组间数据比较采用独立样本t检验。
miR-199a-3p在UM96中高表达，而在OCM290中表达明显下调（t=13.2，P<0.001）。OCM290细胞转染miR-199a-3p后，MTS结果显示实验组细胞数为对照组的（23.8±1.7）%，细胞增殖明显被抑制（t=78.1，P<0.001)；细胞克隆数减少；细胞周期滞留在G1期（t=-8.5，P=0.001）；Western blot法检测发现miR-199a-3p能下调OCM290中CDK2、CDK4、E2F1等的表达水平（t=10.3，P=0.001；t=9.9，P=0.001；t=10.4，P<0.001）。
miR-199a-3p通过下调调控细胞周期进程的关键蛋白，影响细胞周期的进程，从而抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖。
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脉络膜黑色素瘤是成人最常见的眼内恶性肿瘤之一，易侵袭转移[1]。轻则视力严重受损，重则发生全身转移，平均存活时间不到7个月[2,3]。其治疗方式主要基于局部控制治疗，而无个性化治疗；对已有转移者，无理想有效的治疗方案[4]。MicroRNAs（miRNAs）是一类分布广泛的小的非编码蛋白质的RNAs，其功能是负调控基因表达[5]。研究表明miRNAs可以抑制重要的肿瘤相关基因的表达，可能在癌症的诊断和治疗中起重要作用[6]。关于miRNAs在脉络膜黑色素瘤发生发展中的作用，本中心做了一系列的研究工作，发现microRNA-34a、microRNA-137等能够影响脉络膜黑色素瘤细胞的增殖和迁移[7,8]。另有研究报道，microRNA-199a-3p（miR-199a-3p）参与肝癌、结肠癌、卵巢癌等的形成[9,10,11]，但是miR-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞生长的影响，鲜见报道。为此本研究采用阳离子脂质体介导的转染方法将miR-199a-3p转染入人脉络膜黑色素瘤细胞中，恢复其在细胞中的表达，从而观察miR-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞生长的影响，并采用Western blot技术探讨miR-199a-3p在蛋白水平的分子作用机制，为临床肿瘤治疗提供新的理论依据。
