临床研究
原发性开角型青光眼房水差异表达蛋白分析
中华实验眼科杂志, 2019,37(10) : 799-806. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.10.007
摘要
目的

分析原发性开角型青光眼(POAG)患者房水的蛋白质表达变化,探寻与疾病发生相关的生物学标志及潜在治疗靶点。

方法

采用回顾性病例-对照研究设计。纳入2016年10月至2017年12月由天津医科大学眼科医院收治的行白内障手术的年龄相关性白内障患者10例10眼作为年龄相关性白内障组,行青光眼联合白内障手术的POAG合并白内障患者10例10眼作为POAG合并白内障组。术中借助手术通道用1号针头接1 ml针筒进入前房中部吸取约100 μl房水。通过非标记定量蛋白质组学质谱分析技术分析房水中提取的蛋白,采用Maxquant significances A的方法进行差异显著性检验,以P<0.05、差异倍数>2的标准筛选得到2个组患者的差异蛋白,并将生物大数据通过GO功能、KEGG显著性富集分析对差异蛋白的功能及调控的信号通路加以注解。

结果

本次蛋白组学分析共检测到97个差异蛋白,其中包括48个上调蛋白和49个下调蛋白。GO分析显著差异蛋白功能涉及诸多方面,其中与炎症反应有关的有脂多糖结合蛋白(LBP)、CD163、C-反应蛋白(CRP)和膜联蛋白A1(ANXA1);与氧化还原有关的蛋白有谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)和硫氧还原蛋白(TXN);与细胞黏附运动有关:软骨寡聚基质蛋白(COMP)、桥粒胶蛋白(DSC2)和层连蛋白(LAMB2);与纤维化有关的有原胶原蛋白(PLOD1)和固生蛋白(TNC);与神经生长有关:颤蛋白(RELN)、脑信号蛋白(SEMA3F)和轴突导向因子(SEMA4B);与代谢相关的蛋白有丙酮酸激酶(PKM)和羧肽酶N亚型2(CPN2)等。KEGG分析表明NrF2/ERK信号通路、TGF-β/NF-κB信号通路表达在2个组细胞间存在差异。

结论

POAG患者房水中GSTP1、TXN表达显著降低,可能通过调控NrF2/ERK1/2及TGF-β/NF-κB信号通路,调节细胞黏附性和活性以及细胞外基质表达来参与疾病的发展。GSTP1、TXN可能成为潜在生物学标志及治疗靶点。

引用本文: 刘爱华, 王礼明, 吕瀛娟, 等.  原发性开角型青光眼房水差异表达蛋白分析 [J] . 中华实验眼科杂志, 2019, 37(10) : 799-806. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.10.007.
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原发性开角型青光眼(primary angel-open glaucoma,POAG)是一种进行性视神经病变,引起特征性视神经损害和视野缺损,最终致盲[1]。病理性高眼压是视神经损伤的重要因素。青光眼的发病机制目前尚不清楚,基因异常、氧化应激、炎症反应、血管因素等在青光眼发病中起关键作用[2,3,4]。降眼压治疗是目前可行的治疗方式[5],但目前尚无完全有效的治疗方法。房水动态平衡与眼压密切相关,房水为眼前段组织提供营养,带走代谢产物,房水因子改变也反映眼前节组织代谢和病理变化。临床中房水相对易获取,储存方便,是青光眼研究较好的样本来源[6]。近年来组学技术在生物医学研究领域的应用日趋广泛,使得生命科学研究获得了强大的数据产出能力[7,8]。蛋白质组学技术是探究疾病相关差异蛋白的重要技术,已应用到多种疾病的研究中。蛋白质组学技术在眼科中也成为差异蛋白筛选的重要工具,目前,已应用在青光眼、白内障、角膜病变、黄斑病变和葡萄膜炎等疾病中[9,10,11]。然而,相关技术及区域性基因差异等各种因素导致差异蛋白不完全相同[12,13,14,15]。与标记蛋白质谱分析相比,非标记质谱分析具有不受样本量限制、无需昂贵的同位素标记、检测蛋白范围广等优势[16,17,18]。为此,本研究中收集天津地区典型的POAG联合白内障和年龄相关性白内障手术患者的房水进行非标记蛋白质谱分析,以期寻找高眼压与非高眼压白内障患者房水中的差异蛋白,并进一步分析可能的信号机制,通过分析差异蛋白及其作用机制为青光眼诊疗提供可行的生物学靶点。

 
 
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