实验研究
PKH26标记人脂肪间充质干细胞及眼内示踪的可行性研究
中华实验眼科杂志, 2019,37(11) : 876-879. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.11.005
摘要
目的

评估PKH26对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)进行体外标记及眼内标记的可行性。

方法

体外培养hADSCs,使用PKH26对hADSCs进行体外标记并观察标记结果。采用抽签法将C57BL/6J小鼠18只分为正常对照组(6只)、标记细胞组(9只)和未标记细胞组(3只),标记细胞组和未标记细胞组C57BL/6J小鼠玻璃体腔分别注射2×105/ml标记细胞和未标记细胞各1 μl,注射后1个月分别行视网膜铺片观察荧光标记结果。取正常对照组及标记细胞组小鼠视网膜进行苏木精-伊红染色及电子显微镜检查判定毒性反应。

结果

hADSCs经PKH26体外标记后细胞膜呈红色荧光,标记细胞组小鼠玻璃体腔注射标记细胞后1个月可见视网膜血管前红色强荧光,标记细胞组小鼠视网膜苏木精-伊红染色及电子显微镜检查均未见细胞变性坏死及增生。hADSCs体外、体内标记显影结果显示,未标记细胞组均无荧光显色,显色阳性率均为0,标记细胞组均出现红色荧光,显色阳性率均为100%。

结论

PKH26可用于标记hADSCs及眼内示踪,形态学评估显示其无毒性反应。

引用本文: 郭凯, 罗燕, 李士清, 等.  PKH26标记人脂肪间充质干细胞及眼内示踪的可行性研究 [J] . 中华实验眼科杂志, 2019, 37(11) : 876-879. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2019.11.005.
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近年来,干细胞由于其独特的生物学和免疫学特性成为眼科学实验研究及临床应用的热点[1]。随着临床间充质干细胞应用于视网膜变性类疾病的治疗,给更多不可逆性眼病患者带来了新的希望。脂肪来源的间充质干细胞具有获取简单和高分化增生潜能的特点[2],应用前景广阔。在干细胞的研究中,如何从受体辨别移植细胞,有效观察其分化、转归、融合,一直存有争议。细胞标记是解决这类问题的手段之一[3],可以对干细胞进行示踪观察。目前间充质干细胞标记示踪方法主要有同位素法、抗原法、荧光蛋白法、荧光染料法等,优缺点不同。为此,本研究使用标志物PKH26对人脂肪间充质干细胞(human adipose derived mesenchymal stem cells,hADSCs)进行荧光染料法细胞标记,观察其体外标记和眼内示踪的可行性及眼内应用的安全性,为干细胞移植的示踪研究提供方法学基础。

 
 
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