实验研究
重组人血管内皮抑素对早期糖尿病大鼠视网膜屏障相关蛋白的影响
中华实验眼科杂志, 2020,38(09) : 740-745. DOI: 10.3760/cma.j.cn115989-20190228-00092
摘要
目的

观察重组人血管内皮抑素(ES)对链脲佐菌素(STZ)诱导的早期糖尿病大鼠视网膜屏障相关蛋白表达的影响。

方法

采用STZ诱导制作糖尿病大鼠模型,取36只造模成功后2周的糖尿病大鼠按照随机数字表法分为模型组、ES 1.0 μl组、ES 2.5 μl组、ES 5.0 μl组、贝伐单抗2.5 μl组和联合治疗组,每组各6只,并根据分组情况右眼玻璃体腔分别注射不同剂量的重组人ES和贝伐单抗。同时选取6只正常大鼠作为空白对照组。于玻璃体腔注药后4周,采集各组大鼠右眼视网膜组织,采用Western blot法检测视网膜组织中claudin-5、occludin、细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、血管细胞黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。

结果

糖尿病模型大鼠均相继表现出多饮、多尿、多食等典型糖尿病表现,体质量明显下降,造模成功率为100%。Western blot检测结果显示,空白对照组、ES 2.5 μl组、ES 5.0 μl组、贝伐单抗2.5 μl组、联合治疗组VCAM-1、ICAM-1、VEGF相对表达量均较模型组下降,claudin-5、occludin的相对表达量均较模型组升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ES 1.0 μl组occludin蛋白相对表达量为0.23±0.02,明显高于模型组的0.13±0.02,ES 1.0 μl组ICAM-1、VEGF蛋白相对表达量分别为0.53±0.01和0.57±0.00,明显低于模型组的0.81±0.01和0.86±0.00,差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着ES给药剂量的增加,claudin-5和occludin蛋白相对表达量有升高的趋势,VCAM-1、ICAM-1、VEGF蛋白相对表达量有下降趋势。

结论

重组人ES可能通过直接或间接减少炎性因子VCAM-1、ICAM-1的释放、抑制VEGF的表达从而减少视网膜紧密连接蛋白claudin-5和occludin的缺失。

引用本文: 周进华, 解正高. 重组人血管内皮抑素对早期糖尿病大鼠视网膜屏障相关蛋白的影响 [J] . 中华实验眼科杂志,2020,38 (09): 740-745. DOI: 10.3760/cma.j.cn115989-20190228-00092
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糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)严重危害糖尿病患者的视力,其主要原因为视网膜水肿和视网膜新生血管形成[1]。DR的发病机制复杂,目前认为可能与高糖环境的刺激、蛋白激酶C的激活、血流异常以及炎症因素等密切相关,炎症反应及相关细胞因子也参与了DR的发生和发展过程。细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)作为黏附分子免疫球蛋白超家族中的2个重要成员,在炎性因子刺激下与其受体结合促进内皮细胞活化,使得白细胞易于穿透血管内皮,是破坏血-视网膜屏障、诱发血管形成的主要因素之一[2,3,4]。Claudin-5和occludin组成的紧密连接蛋白复合体是维持血-视网膜屏障的结构基础[5]。研究表明重组人血管内皮抑素(vascular endostatin,ES)能够抑制实验动物脉络膜新生血管的形成和人脐静脉内皮细胞的迁移、侵袭[6],从而发挥抑制血管生成的作用,但其对正常静止的内皮细胞无明显影响。本研究旨在观察重组人ES对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的早期糖尿病大鼠紧密连接蛋白claudin-5、occludin以及ICAM-1、VCAM-1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等因子表达的影响,以期望通过早期抑制炎症反应,减轻炎性因子的释放来抑制DR的进展,从而为DR的治疗寻找新的方向。

 
 
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