基础研究
机械牵张对人肺血管内皮细胞通透性的影响及其分子机制
中华重症医学电子杂志, 2019,5(2) : 151-158. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-1537.2019.02.013
摘要
目的

观察机械牵张对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)和人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)通透性的影响及对通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5和Caveolin-1表达的调控。

方法

采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC(ATCC)和HPMVEC(ATCC)施加0.5 Hz频率10%或20%牵张应力。应用qRT-PCR及Western Blot方法检测机械牵张前后内皮通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5、Caveolin-1 mRNA和蛋白含量表达变化。采用细胞动态分析仪以及Transwell小室/异硫氰酸荧光素(FITC)-白蛋白法检测机械牵张后的HPAEC细胞和HPMVEC细胞通透性改变。

结果

20%机械牵张后,与对照组比较,HPAEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达、Claudin-5 mRNA和蛋白表达和Caveolin-1 mRNA表达均下降(P<0.05),而Caveolin-1蛋白水平较对照组无明显变化;HPMVEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达,Caveolin-1 mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),而Claudin-5 mRNA和蛋白水平较对照组无明显变化。

结论

机械牵张会导致肺血管内皮通透性增高,是通过下调通透性关键蛋白的表达,并且两种细胞的通透性影响机制有差异,HPAEC牵涉紧密连接,HPMVEC牵涉跨内皮细胞途径。

引用本文: 王亚, 兰媛, 傅威, 等.  机械牵张对人肺血管内皮细胞通透性的影响及其分子机制 [J/CD] . 中华重症医学电子杂志,2019,5 (2): 151-158. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-1537.2019.02.013
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急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是以多种诱因所导致的严重肺损伤,以低氧血症和呼吸窘迫为主要临床表现。虽然经过几十年的临床探索和治疗手段的不断改进,如小潮气量、合理呼气末正压通气(positive end expiratory pressure,PEEP)、俯卧位通气、肌松剂的使用,目前极重度ARDS的病死率仍在40%以上,是重症医学科(intensive care unit,ICU)中发病率及病死率较高的危重症之一。机械通气是ARDS重要支持手段之一[1,2,3]。但呼吸机的应用也可能会导致或加重肺损伤,即呼吸机相关性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)。VILI的主要特征为肺血管内皮和肺泡上皮通透性的增高以及肺部炎症的发生[4,5,6,7,8],其具体发生机制仍然不明确,故进一步研究VILI的发生机制,对防治VILI有着重要的临床意义。机械牵张是一种在体外模拟机械通气的实验方法,可以在体外探索VILI相关发生机制。本研究旨在探索机械牵张对人肺动脉内皮细胞(human pulmonary artery endothelial cell,HPAEC)及人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMVEC)通透性的影响以及调节机制,进一步丰富对VILI发病机制的认识,在分子层面对VILI的防治提供新的线索。

 
 
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