B族链球菌(group B streptococcus，GBS)，又称为无乳链球菌，为有荚膜双球菌，是定植于患者胃肠道及泌尿生殖道的常见机会致病菌，是导致新生儿败血症、脑膜炎及肺炎，以及孕妇发生胎膜早破及早产的主要致病菌之一。新生儿感染GBS主要来自于母亲感染或胃肠道及泌尿生殖道定植的GBS。因此，对孕产妇感染GBS进行耐药情况、血清型、毒力基因及基因型的研究，具有重要临床意义。已检测出的GBS血清型包括Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ及Ⅸ型，不能检测出的血清型记为不可分型(non-typeable, NT)^[1]。GBS毒力基因主要包括bac、bca、scpB、lmb及hylB^[2]。多位点序列分型(multilocus sequence typing，MLST)技术，可通过管家基因测定，综合分析GBS序列分型，是近年对细菌及其他病原体基因型进行鉴定的重要方法之一。本研究通过分析深圳市人民医院孕产妇感染或定植的GBS耐药情况、血清型、毒力基因及基因型特点，旨在为临床治疗及预防孕产妇GBS感染提供指导。现将研究结果报道如下。

美国疾病控制中心对围生期GBS的防治指南推荐，对青霉素过敏者，若对红霉素耐药而对克林霉素敏感，并且为诱导克林霉素耐药阴性者，可选用克林霉素进行抗GBS治疗；对青霉素有强变态反应风险者，若对克林霉素耐药，则可选用万古霉素进行抗GBS治疗^[7]。Gygax等^[8]研究发现，GBS对大环内酯类抗菌药物的耐药性逐渐增加，对青霉素的耐药性无明显改变。这使对青霉素过敏的孕产妇感染GBS后，可选择的抗菌药物范围缩小。Crespo-Ortiz等^[9]对拉丁美洲医院2个不同阶段GBS感染的研究发现，GBS对红霉素及克林霉素的耐药性增加，同时发现对青霉素及氨苄西林不敏感菌株。本研究结果显示，孕产妇感染或定植GBS对青霉素的敏感率为100%，这与大部分研究结果相似，提示感染GBS的孕妇可首选青霉素进行抗GBS治疗。对于青霉素过敏的孕产妇而言，感染GBS后须选择其他既有抗GBS作用，又不对胎儿造成伤害的药物。对中国北京妇产科医院40例GBS感染新生儿的研究显示，GBS菌株对青霉素、头孢噻肟及左氧氟沙星的敏感率为100.0%；而对克林霉素、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素及四环素的耐药率则分别为90.0%、95.0%、97.5%、100.0%及100.0%^[10]。北京同仁医院的研究结果显示，孕妇感染GBS菌株对红霉素与克林霉素的耐药率分别为66.2%与55.7%^[11]。本研究结果显示，纳入研究的60株GBS菌株，对四环素、红霉素、克林霉素的耐药率分别为88.3%、70.0%及43.3%，其中14株对红霉素耐药，对克林霉素敏感的菌株中，3株为D-试验结果呈阳性，即在红霉素诱导下，对克林霉素敏感菌株中有对克林霉素耐药者。此外，本组GBS菌株对左氧氟沙星的耐药率相对较低。Bolukaoto等^[4]研究发现，GBS菌株对四环素的耐药率为86.7%。Goudarzi等^[12]对100株孕妇感染GBS菌株进行研究的结果发现，对红霉素及克林霉素耐药率均为100%，但仅4%对青霉素耐药，建议临床继续使用青霉素进行抗GBS治疗，对青霉素过敏患者，可选用万古霉素进行抗GBS治疗。Beigverdi等^[13]对41株孕妇感染GBS菌株的研究发现，GBS菌株对红霉素和克林霉素的耐药率分别为24.4%及14.6%，而对四环素的耐药率高达97.6%。Woldu等^[14]对纳入研究的2两家医院提供的300株孕妇感染GBS菌株进行研究发现，仅有1株GBS菌株对红霉素敏感，对青霉素敏感度为55%。Abarzúa等^[15]对167株孕妇感染的GBS菌株进行研究的结果显示，其中16株对红霉素耐药，23株对克林霉素耐药，推荐对青霉素过敏患者使用头孢唑啉或万古霉素进行抗GBS治疗。Shabayek和Abdalla^[16]对100株孕妇感染的GBS菌株进行研究发现，GBS菌株对红霉素及克林霉素的耐药率分别为17%和14%，对四环素的耐药率则高达98%。Fröhlicher等^[17]对孕妇感染的GBS菌株进行研究发现，所有菌株对青霉素敏感，而对红霉素及克林霉素的耐药率分别为14.5%和14%；在所有菌株中，对红霉素耐药而对克林霉素敏感者为5.8%，因此建议对青霉素过敏的孕妇选用克林霉素抗进行抗GBS治疗。这与本研究GBS菌株对大环内酯类抗菌药物耐药情况有较大差异，究其原因可能与产前产妇预防性使用抗菌药物有关。Liakopoulos等^[18]比较孕妇与新生儿的GBS感染特点发现，孕妇感染的GBS菌株对红霉素的耐药率为20.47%，新生儿感染的GBS菌株对红霉素的耐药率为76.10%。Turner等^[19]研究发现，孕妇感染的GBS菌株对青霉素、头孢唑啉及万古霉素的敏感度均为100.0%，对红霉素及克林霉素的敏感度均为91.5%。本研究GBS对大环内酯类抗菌药物的耐药率与北京GBS对这类抗菌药物的耐药率相近，而不同国家及地区的大环内酯类抗菌药物的耐药率，则存在差异，究其原因可能与地区及人种差异有关。产前及产时对GBS进行抗菌药物预防性使用，增加了大环内酯类抗菌药物的耐药率。GBS对四环素的耐药率较高且不良反应较多，不建议临床将其作为抗GBS治疗的首选药物。对青霉素过敏的患者，可选择万古霉素或者左氧氟沙星治疗。

既往研究结果显示，大环内酯类抗菌药物的耐药基因包括ermA、ermB、ermC、ermTR、mefAE、mefA及linB等^[8]。Morozumi等^[20]研究结果显示，22%GBS菌株包含mefAE、ermA和ermB基因，可以部分解释GBS对大环内酯类抗菌药物耐药的原因。北京妇产科医院检测GBS对红霉素的耐药基因发现，27株仅有ermB基因，2株仅有mefA基因，8株同时具有ermB及mefA基因^[21]。本研究40株对红霉素耐药的GBS菌株中，25株有ermB基因，22株有mefAE基因，1株有ermTR基因，7株同时具有ermB及mefAE基因，提示本组GBS菌株的红霉素耐药基因主要与ermB及mefAE基因有关。Chang等^[22]通过PCR法检测红霉素及克林霉素的耐药基因的研究发现，14株对红霉素耐药的GBS菌株中，10株含ermA基因，无ermB及linB基因；对克林霉素耐药的菌株中，有检测出linB基因者；而同时对红霉素及克林霉素耐药的GBS菌株中，有6株有ermB基因，1株有mefAE基因。本组GBS菌株未检测出ermA及ermC基因，这与国外研究报道有差异，可能与存在人种差异有关。GBS菌株的克林霉素耐药基因主要与linB基因有关，本组GBS对克林霉素耐药的26株菌株中，10株有linB基因。GBS的四环素耐药基因主要有tetO、tetM、tetS、tetL、tetK及tetT等，本组对四环素耐药的GBS菌株主要有tetO及tetM基因，该结果与其他国家GBS菌株的四环素耐药情况相似。

目前已发现的GBS血清型包括Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ及Ⅸ型，未能检测出的血清型记为NT。不同地区报道的GBS感染率不同，感染的GBS血清型，也因区域及人种差异而有差异，但总体是以Ⅲ、Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ及Ⅴ型等血清型致病为主。国外以血清型Ⅲ型最常见。Wang等^[23]研究323株GBS菌株的常见血清型以Ⅰb、Ⅲ、Ⅴ及Ⅵ型为主。本组60株围生期孕产妇感染或定植GBS菌株检出的血清型为Ⅲ、Ⅰb、Ⅰa、Ⅴ、Ⅵ、Ⅱ型及NT，其中Ⅰb型为36.7%，Ⅰa型为28.3%，Ⅲ型为18.3%。Lu等^[11]研究201株GBS菌株，41.8%血清型为Ⅲ型，21.4%为Ⅰa型，11.9%为Ⅰb型。巴西Dutra等^[24]对434株成年人感染的GBS进行检测，主要血清型依次为Ⅰa型(27.6%)、Ⅱ型(19.1%)、Ⅰb型(18.7%)、Ⅴ型(13.6%)及Ⅲ型(6.7%) 。Fröhlicher等^[17]研究的GBS菌株，Ⅲ型为最常见血清型。Soares等^[25]认为，血清型Ⅲ及Ⅴ型为孕妇感染GBS的最常见血清型，其基因型与表型与GBS感染相关。Otaguiri等^[26]发现，在大部分GBS菌株中，常见血清型依次为Ⅰa型(42.2%)、Ⅴ型(30.1%)、Ⅲ型(14.5%)及Ⅱ型(10.8%)。Turner等^[19]研究发现，GBS最常见血清型为Ⅱ型。国外报道的关于新生儿感染GBS的血清型主要为Ⅲ型，如西班牙212株新生儿感染GBS菌株中，78%为血清型Ⅲ及Ⅰa型，所有菌株均有Alps或类似的蛋白质；而血清型Ⅰb与bca基因，血清型Ⅱ与bca基因相关^[27]。本组不同血清型GBS的毒力基因，均主要为hylB，其次为lmb或scpB，该结果与以上提及国家的研究结果存在差异，究其原因，可能与研究人群的差异有关。本组60株GBS菌株的基因ST中，ST19为30.0%，ST23为11.7%，ST12与ST103均为8.3%，ST485为6.7%。可见，本组GBS菌株的基因型以ST19及ST23为主，这与国内外相关研究结果有较大差异^[6]。Jones等^[6]研究发现，ST1、17、19及23为常见的ST分型。Liakopoulos等^[18]研究发现，孕妇感染的GBS菌株最常见ST分型为ST1，新生儿感染的GBS菌株最常见ST分型为ST17。本组GBS血清型与基因型，均与我国北京及国外相关研究的文献报道差异较大，提示GBS可能存在地区及人种方面的差异。通过进一步研究每个地区的GBS血清型与基因型特性，可为临床预防及治疗GBS感染提供实用性指导。

综上所述，GBS对青霉素敏感，对红霉素、克林霉素及四环素耐药率较高，建议对青霉素不过敏患者首选青霉素抗GBS治疗，对青霉素过敏患者，应先进行药敏试验后结合患者临床特征进行抗菌药物选择。围生期孕产妇感染或定植GBS的红霉素耐药基因，主要与ermB、mefAE有关，其中血清型Ⅰb与ermB基因相关，血清型Ⅰa与mefAE基因相关，血清型Ⅲ与ermB及mefAE基因相关。本组围生期孕产妇感染或定植GBS血清型以Ⅰb及Ⅰa为主，基因型以ST19及ST23为主，GBS的毒力基因主要为hylB，lmb及scpB。