论著
萝卜硫素对脓毒症急性肺损伤大鼠氧化损伤及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1表达的影响
中华危重症医学杂志(电子版), 2017,10(4) : 246-251. DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2017.04.007
摘要
目的

评价萝卜硫素对脓毒症急性肺损伤大鼠氧化应激损伤及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)表达的影响。

方法

按随机数字表法将60只Sprague-Dawley大鼠分成三组:假手术组、模型组和治疗组,每组各20只。假手术组仅进行剖腹和关腹操作,模型组和治疗组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型,治疗组大鼠在术后立即通过腹腔内注射给予50 mg/kg的萝卜硫素注射液,其余两组注入等量等渗NaCl溶液。于术后24 h右侧颈总动脉采集动脉血标本,然后处死大鼠取肺组织。光镜下观察病理学结果,测定肺组织湿/干比。同时,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织匀浆标本谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)表达情况,采用蛋白质印迹法检测肺组织APE1的表达。

结果

苏木素-伊红(HE)染色结果显示,假手术组肺组织结构清晰,未见明显水肿以及炎症细胞浸润;与假手术组相比,模型组大鼠肺组织病理形态学损伤严重,而治疗组肺组织损伤较模型组有所减轻。三组大鼠肺组织湿/干比(3.49 ± 0.26、5.56 ± 0.20、4.96 ± 0.15)、动脉氧合指数(453 ± 23、232 ± 22、332 ± 11)、GSH[(8.57 ± 0.26)、(4.36 ± 0.08)、(6.23 ± 0.20)mg/g]及SOD表达水平[(91.0 ± 3.0)、(55.5 ± 2.5)、(72.1 ± 2.4)NU/mg]比较差异均有统计学意义(F = 107.897、128.676、275.863、183.797,P均< 0.001)。进一步两两比较发现,模型组、治疗组大鼠肺组织湿/干比较假手术组均显著上升(P均< 0.05),治疗组肺组织湿/干比较模型组下降(P < 0.05);而模型组、治疗组动脉氧合指数及氧化损伤指标GSH和SOD水平较假手术组均显著下降(P均< 0.05),且治疗组较模型组均上升(P均< 0.05)。蛋白质印迹法结果显示三组大鼠肺组织APE1表达水平比较差异有统计学意义(F = 453.991,P < 0.001),进一步两两比较发现模型组、治疗组大鼠肺组织APE1表达较假手术组均显著下降(P均< 0.05),但治疗组较模型组明显上升(P < 0.05)。

结论

萝卜硫素可减轻脓毒症大鼠急性肺损伤,其机制可能与改善肺组织氧化应激反应及上调APE1表达有关。

引用本文: 汤鲁明, 王林霞, 孙来芳, 等.  萝卜硫素对脓毒症急性肺损伤大鼠氧化损伤及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1表达的影响 [J/OL] . 中华危重症医学杂志(电子版), 2017, 10(4) : 246-251. DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2017.04.007.
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研究表明,脓毒症是由感染所致的严重全身炎症反应综合征,可导致肺组织发生氧化应激和炎症反应,致使中性粒细胞激活、集聚和炎症介质大量释放等,进一步发展为急性肺损伤(acute lung injury,ALI)甚至急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)[1]。脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)作为一种"氧化还原因子",可通过调控多种与细胞氧化还原反应相关的转录因子活性,包括核因子κB(nuclear factor-κappa B,NF-κB)、活化蛋白1(activated protein-1,AP-1)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)、P53等,参与细胞的增殖、凋亡和分化等多种关键的细胞反应[2]。本课题组既往研究发现,过表达APE1可以显著降低脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞氧化反应,但在ALI肺组织中的表达情况目前尚不清楚[3]。萝卜硫素是一种从十字花科植物中获得的有机硫复合物,具有诱导抗氧化酶的产生,从而发挥抗炎症、抗氧化和去毒性的作用。超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)是生物体内两种重要的抗氧化剂,SOD可直接催化氧化应激产生的大量超氧化物转变为过氧化氢,而GSH可直接清除活性氧或催化其他抗氧化酶生成从而间接清除活性氧。文献报道,GSH和SOD水平降低提示氧化产物的大量产生,机体抗氧化能力的下降[4]。新近研究证实,萝卜硫素对于慢性阻塞性肺疾病及ALI具有一定的保护作用,但其确切作用和机制尚不清楚[5,6]。本研究拟通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症ALI大鼠模型,采用萝卜硫素干预治疗,探讨萝卜硫素对于模型大鼠ALI氧化损伤及APE1表达的影响。

 
 
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