• 论著 •
人DC-SIGN基因表达质粒的构建及其表达
国际呼吸杂志, 2011,31(15)
: 1169-1173. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436x.2011.015.013
摘要
目的 构建含有人DC-SIGN基因的真核表达载体,并在293T细胞中表达目的 蛋白.方法 人血培养获得树突状细胞(DC),以DC的mRNA逆转录cDNA为模板,应用PCR体外扩增获得目的 DNA,用限制性内切酶Sal Ⅰ和BamH Ⅰ分别酶切VRC4409载体和PCR产物,通过连接、转化及克隆的筛选将目的 基因克隆入载体VRC4409,构建载体VRC4409-DC-SIGN,经PCR鉴定及测序分析证实,脂质体介导转染293T细胞,蛋白质印迹分析其表达DC-SIGN蛋白.结果 重组质粒经双酶切和测序鉴定证实VRC4409-DC-SIGN构建成功,DC-SIGN蛋白在293T细胞中成功表达.结论 成功构建质粒VRC4409-DC-SIGN并在293T细胞中表达目的 蛋白,为进一步研究DC-SIGN的生物学功能奠定了基础。
引用本文:
邵长周,
张浩茹,
瞿介明,
等.
人DC-SIGN基因表达质粒的构建及其表达
[J]
. 国际呼吸杂志,2011,31(
15
): 1169-1173. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436x.2011.015.013
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