论著
猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答
中华地方病学杂志, 2015,34(10) : 717-722. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2015.10.005
摘要
目的

探讨猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔猪后,对猪带绦虫卵攻击感染后的保护性免疫应答。

方法

将20头40日龄健康仔猪按体质量(约15 kg)采用随机数字表法分为5组,每组4头。分别为重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗灌胃组、重组Bb-TSO45W-4B疫苗灌胃组、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组、空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组。各疫苗的免疫剂量为1 × 1011菌落形成单位(CFU),间隔2周免疫1次,共免疫2次。于末次免疫仔猪4周后,各组仔猪用猪带绦虫卵攻击感染,攻击感染后3个月剖杀仔猪,分离猪囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC)。酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清免疫球蛋白(Ig)G、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况。

结果

猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组减蚴率分别为83.09%、71.36%和74.85%。仔猪血清IgG、IgG1和IgG2a水平组间比较差异均有统计学意义(F=132.348、106.336、596.091,P< 0.05)。其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IgG、IgG2a水平[(366.81 ± 3.84)、(334.94 ± 11.65)、(333.52 ± 11.09),(87.74 ± 0.95)、(84.48 ± 0.80)、(84.30 ± 1.09)mg/L]均高于MRS对照组[(245.94 ± 8.81)、(62.61 ± 0.84)mg/L,P均< 0.05],IgG1水平[(26.55 ± 1.06)、(33.24 ± 1.92)、(32.60 ± 1.94)mg/L]低于MRS对照组[(42.78 ± 0.87)mg/L,P均< 0.05]。仔猪PBMC培养上清原液中IL-2、IFN- γ、IL-4和IL-10水平组间比较差异均有统计学意义(F=139.522、1 053.102、769.097、962.298,P均< 0.05)。其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IL-2、IFN-γ水平[(212.24 ± 3.12)、(205.91 ± 3.18)、(205.85 ± 4.35),(28.42 ± 0.28)、(25.56 ± 0.28)、(25.71 ± 0.35)ng/L]均高于MRS对照组[(174.19 ± 2.14)、(17.69 ± 0.28)ng/L,P均< 0.05],IL-4、IL-10水平[(40.45 ± 0.36)、(41.38 ± 0.70)、(41.52 ± 0.19),(71.45 ± 0.83)、(73.38 ± 0.70)、(74.77 ± 0.41)ng/L]均低于MRS对照组[(52.57 ± 0.29)、(94.82 ± 0.45)ng/L,P均< 0.05]。仔猪PBMC增殖水平组间比较差异有统计学意义(F=56.318,P< 0.05)。其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组PBMC增殖水平(0.543 ± 0.074、0.481 ± 0.028、0.530 ± 0.053)均高于MRS对照组(0.242 ± 0.053,P均< 0.05)。

结论

猪带绦虫重组Bb-TSO45W- 4B-TSOL18疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用。

引用本文: 贾启, 刘美辰, 周泠, 等.  猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答 [J] . 中华地方病学杂志,2015,34 (10): 717-722. DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2015.10.005
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猪囊尾蚴病(Cysticercosis)俗称猪囊虫病,是由猪带绦虫(Taenia solium)的中绦期幼虫猪囊尾蚴引起的一种严重危害畜牧业生产和人类健康的人畜共患寄生虫病。手术及药物治疗都有其局限性,因而,有保护作用的疫苗将成为控制该病流行的有效工具。TSO45W-4B和TSOL18是猪带绦虫六钩蚴阶段的两个特异性抗原基因,具有良好的免疫原性和保护性,是理想的猪带绦虫候选疫苗基因[1]。双歧杆菌(BifidobacteriumBb)是人和哺乳动物肠道重要的益生菌,具有抗菌、抑瘤、免疫调节和营养等多种生理作用。近年来,随着基因工程技术的应用,选择具有益生功能的Bb作为载体传递系统,已在细菌、病毒、肿瘤、寄生虫等领域得到了广泛应用[2]。而就寄生虫领域,猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗报道不多,为此,本实验拟在成功构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗[3,4]的基础上,以该疫苗免疫仔猪,猪带绦虫卵攻击,通过计算减蚴率,检测猪血清免疫球蛋白(Ig)G、IgG1、IgG2a水平,猪外周血淋巴细胞(PBMC)增殖水平和PBMC培养上清液中白细胞介素(IL)-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平等指标,进一步观察该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其保护性免疫机制。

 
 
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