• 论著 •
一种减少包涵体变复性过程中产生的蛋白多聚体的方法
国际生物制品学杂志, 2018,41(6)
: 291-294. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.06.008
摘要
目的
优化蛋白制备工艺,减少原核表达包涵体变复性产生的多聚体。
方法
根据原始工艺进行菌体培养、破壁以及包涵体收集和变复性。然后在包涵体复性液中直接添加硫酸铵固体(优化工艺)。离心去沉淀,收集上清液制备蛋白粗制品。对原始工艺和优化工艺制备的蛋白粗制品进行凝胶蛋白结合量、蛋白回收率、纯化蛋白量以及细胞杀伤活性比较。
结果
与原始工艺相比,增加30%饱和度硫酸铵沉淀步骤的优化工艺可使1 ml层析凝胶的蛋白结合量由1 mg提高至20 mg,单位体积发酵液蛋白回收率由10%增加至90%,400 ml发酵液所得的纯化蛋白量由3 mg提升至15 mg。蛋白粗制品的平均半数抑制浓度从0.077 99 μg/ml降至0.045 69 μg/ml。
结论
在包涵体复性液中添加硫酸铵可有效减少多聚体。
引用本文:
彭延杰,
丁艳,
展波,
等.
一种减少包涵体变复性过程中产生的蛋白多聚体的方法
[J]
. 国际生物制品学杂志, 2018, 41(6)
: 291-294.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.06.008.
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