论著
国产与进口牛血清促进Vero细胞生长的比较
国际生物制品学杂志, 2019,42(6) : 270-273. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2019.06.003
摘要
目的

通过对国产与进口牛血清促进Vero细胞生长的比较,筛选可替代进口血清用于轮状病毒疫苗生产中Vero细胞培养的国产牛血清。

方法

以国产的3批胎牛血清和1批新生牛血清为待评血清,以进口胎牛血清为对照血清,制备细胞培养液。在T175细胞培养瓶(T瓶)和2层细胞工厂中连续传代培养Vero细胞各3代,观察每一代次的培养上清液、细胞形态和细胞汇合度,计算细胞收获量和与对照血清相比较的相对增长率。采用单样本t检验对细胞收获量与生产要求的细胞产量(T瓶:>1.50×107个/ml;细胞工厂:>3.00×108个/ml)进行比较。根据细胞相对增长率判断国产血清与进口对照血清促细胞生长活性的相近程度。

结果

国产血清培养的Vero细胞生长状态均良好。T瓶培养时,国产血清组的细胞收获量为(1.56~9.30)×107个/ml,与生产要求细胞产量的差异有统计学意义(t=2.44~3.76,P<0.05),且t值均>0,说明符合生产要求。细胞相对增长率接近或超过100%。细胞工厂培养时,国产血清组的细胞收获量为(1.80~4.92)×108个/ml,与生产要求产量之间的差异无统计学意义(t=-0.23~1.16,P>0.05),但是只有1批胎牛血清和新生牛血清的细胞收获量均值>3.00×108个/ml,且细胞相对增长率>90%。

结论

经与进口牛血清比较,国产的1批胎牛血清和1批新生牛血清可替代进口血清,用于轮状病毒疫苗生产中的Vero细胞培养。

引用本文: 王梅珂, 张久威, 杨彪, 等.  国产与进口牛血清促进Vero细胞生长的比较 [J] . 国际生物制品学杂志,2019,42 (6): 270-273. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2019.06.003
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轮状病毒疫苗生产中采用Vero细胞规模化培养病毒。Vero细胞是贴壁依赖性成纤维细胞。牛血清中的生长激素、结合蛋白、蛋白酶抑制因子等可促进Vero细胞贴壁和生长,是细胞培养不可缺少的重要物质。然而,不同来源和不同批次的牛血清质量差异较大,会影响细胞的质量[1,2],因此,在使用或变换血清进行大规模生产前,需要对不同厂家以及不同批次的牛血清进行筛选。目前,实验室用的血清多为进口血清,但是采用进口血清进行大规模生产,成本会大大提高。因此,需要从相对价廉的国产血清中筛选可代替进口血清的细胞培养用血清。

 
 
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