论著
shRNA靶向干扰NHERF1对PC-3M前列腺癌细胞生物学行为的影响
国际肿瘤学杂志, 2015,42(1) : 14-17. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2015.01.004
摘要
目的

探讨shRNA靶向干扰钠氢交换调节因子(NHERF)1后对前列腺癌细胞PC-3M生物学行为的影响。

方法

将pSuper.puro NHERF1 shRNA质粒和阴性对照质粒pSuper.puro luciferase shRNA分别转染人PC-3M前列腺癌细胞,经嘌呤霉素筛选,建立稳定低表达NHERF1的PC-3M细胞株。经Western印迹验证后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测肿瘤细胞增殖活性,采用划痕实验检测NHERF1-shRNA对前列腺癌PC-3M细胞迁移能力的影响,采用流式细胞仪检测NHERF1-shRNA对PC-3M细胞凋亡的影响,采用Western印迹检测NHERF1-shRNA对凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2表达的影响。

结果

转染NHERF1-shRNA组比未转染及空载组细胞的增殖能力明显降低(F=62.63,P=0.004);转染NHERF1-shRNA组比未转染及空载组细胞的迁移率明显降低。相比于未转染PC-3M细胞和转染阴性对照质粒细胞,转染NHERF1-shRNA组细胞的凋亡百分比明显增加[(2.55±0.92)%和(11.98±3.28)%],达4倍以上(t=-2.392,P=0.001);Bcl-2蛋白的表达降低,Bax蛋白的表达升高。

结论

靶向NHERF1的序列特异性shRNA可抑制PC-3M细胞的增殖和迁移,并促进细胞凋亡。

引用本文: 马强, 郑君芳, 焦延娜, 等.  shRNA靶向干扰NHERF1对PC-3M前列腺癌细胞生物学行为的影响 [J] . 国际肿瘤学杂志,2015,42 (1): 14-17. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2015.01.004
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钠氢交换调节因子1(Na/H exchanger regulatory factor 1, NHERF1)是近年来新发现的一种与肿瘤密切相关的多功能连接蛋白,其通过与多种致癌或抑癌蛋白结合在不同肿瘤中发挥不同功能[1]。本研究将NHERF1-shRNA质粒稳定转染到NHERF1高表达的PC-3M细胞中,观察靶向干扰NHERF1后对PC-3M细胞增殖、迁移及凋亡的影响。

 
 
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