探讨在白血病细胞HL-60分化过程中nm23-H1、c-Myc、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的作用机制及相互关系，为临床治疗提供理论依据和治疗靶点。
CCK-8实验测定全反式维甲酸(ATRA)作用下的靶细胞增殖情况，瑞士-吉姆萨染色观察细胞形态学变化。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)或Western blotting测定nm23-H1、c-Myc和G-CSF的基因、蛋白表达水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定ATRA诱导HL-60细胞分化过程中培养上清G-CSF水平的变化。
分别使用药物浓度为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 μmol/L的ATRA诱导HL-60细胞72 h，细胞增殖抑制率分别为(43.00±0.08)%、(49.55±2.30)%、(58.90±6.70)%、(64.60±4.70)%、(72.70±3.20)%，差异有统计学意义(F＝69.887，P＝0.000)。在ATRA诱导下，细胞形态学证实HL-60细胞向成熟粒细胞方向分化。nm23-H1的mRNA相对表达量由0.79±0.03逐渐降低到0.52±0.09，差异有统计学意义(F＝9.679，P＝0.002)，蛋白相对表达量由1.54±0.12逐渐降低到0.40±0.04，差异有统计学意义(F＝90.140，P＝0.000)。c-Myc的mRNA相对表达量由0.95±0.05逐渐降低到0.46±0.05，差异有统计学意义(F＝27.900，P＝0.000)，蛋白相对表达量由1.12±0.11逐渐降低到0.14±0.03，差异有统计学意义(F＝115.500，P＝0.000)。而G-CSF的mRNA相对表达量由0.26±0.07逐渐升高到0.55±0.09，差异有统计学意义(F＝7.817，P＝0.004)，细胞分泌水平由(13.67±7.51)pg/ml逐渐升高到(128.30±25.77)pg/ml，差异有统计学意义(F＝28.020，P＝0.000)。
nm23-H1可能通过与c-Myc和G-CSF相互作用而发挥其诱导白血病HL-60细胞分化的作用。
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nm23-H1基因既是转移抑制因子又是分化抑制因子，Okabe-Kado等[1]发现一种分化抑制因子(Ⅰ因子)即nm23-H1，核苷二磷酸激酶NDPK-A是转移抑制因子nm23-H1基因编码的蛋白质产物[2]。在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等多种人类癌症中高水平表达的nm23-H1基因能有效抑制肿瘤细胞的转移。但是，在多种血液恶性肿瘤和神经母细胞瘤中，nm23-H1基因的过高表达不利于患者的存活和康复[3,4,5,6,7]。nm23-H1基因不仅与调控肿瘤转移有关，而且参与造血细胞的增殖分化活动[8]。原癌基因c-Myc编码的蛋白质是与白血病细胞的增殖分化密切相关的转录因子，在90%以上的恶性肿瘤细胞中有人类端粒酶反转录酶的高表达，原癌基因c-Myc参与人类端粒酶反转录酶的调控，并且通过促进或抑制靶基因的转录而发挥转录因子的作用[9,10,11]。分化抑制基因nm23-H1和原癌基因c-Myc有着异常密切的联系，Godfried等[12]报道c-Myc表达上升能够上调nm23-H1的表达，二者呈正相关。粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-sti-mulating factor，G-CSF)是一种自分泌和旁分泌的细胞因子。它能够刺激正常细胞和白血病髓系祖细胞的生长及分化。本实验研究是在全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)诱导白血病HL-60细胞向成熟粒细胞分化的模型中，探讨nm23-H1通过与c-Myc和G-CSF相互作用而发挥诱导白血病HL-60细胞分化的可能性，并拟为临床治疗提供理论上的依据和治疗靶点。
