探讨3-正丁基苯酞(DL-3-n-Butylphthalide，NBP)对慢性酒精中毒模型小鼠的情绪记忆的改善作用及可能机制。
24只C57/BL6成年雄性小鼠，随机分为对照组(CON组，n＝8)，模型组(AT组，n＝8)，治疗组(AT＋NBP组，n＝8)。AT组及AT＋NBP组小鼠采用酒精灌胃方法建立慢性酒精中毒小鼠模型。AT＋NBP组在酒精造模期间每天一次给予40 mg/kg的NBP灌胃，AT组和CON组给予等剂量的玉米油灌胃，连续14 d。采用旷场实验评估小鼠焦虑样行为，悬尾实验评估抑郁样行为，Morris水迷宫和新物识别评估小鼠记忆能力，Tunel染色评估神经元凋亡数量。原代培养小鼠神经元，在细胞水平上给予酒精和NBP干预，采用荧光钙成像技术检测神经元内的钙离子浓度变化。采用SPSS 17.0进行描述性分析，t检验和方差分析。
AT＋NBP组小鼠在旷场中间区域探索时间较AT组长[(50.68±7.82)s，(38.50±13.93)s；t＝－2.16，P<0.05)]；空间记忆测试中，AT＋NBP组在目标象限探索时间较AT组长[(28.02±7.13)s，(20.98±5.58)s；t＝－2.20，P<0.05]；AT＋NBP组在短记忆测试中2 h时其认知系数RI(0.83±0.08)比AT组(0.68±0.10)高(t＝－3.13，P<0.05)。与CON组比，AT组小鼠前额叶皮层神经元凋亡增加[(17.33±2.51)个，(115.67±6.50)个；t＝－24.41，P<0.001]，AT＋NBP组较AT组减少[(45.00±5.57)个](t＝14.29，P<0.001)；AT组海马齿状回神经元凋亡[(13.75±4.79)个]也较AT＋NBP组少[(5.75±3.30)个](t＝2.75，P<0.05)；神经细胞内钙离子浓度检测结果显示，3种浓度的酒精(100 mmol/L、200 mmol/L、300 mmol/L)均导致神经细胞内相对荧光单位(RFU)△F/F显著增加[(1.43±0.32)，(2.31±1.39)，(1.21±0.73)；t＝－7.67，－2.85，－2.86，均P<0.05]，与之相对应地使用NBP干预的3组神经细胞内RFU变化相对稳定[(－0.04±0.01)，(－0.03±0.01)，(－0.04±0.02)；t＝7.96，2.96，2.92，均P<0.05]。
3-正丁基苯酞可以改善慢性酒精中毒模型小鼠的学习记忆能力，这可能与抑制中毒模型小鼠神经元凋亡、影响神经元细胞内钙离子稳态有关。
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酒精有害使用(harmful use of alcohol)又称酗酒(alcoholism)，是指无节制的反复过量饮酒行为[1]。1990～2016年我国女性的饮酒率是16%，男性的饮酒率48%，45～59岁年龄段是饮酒重灾区，饮酒率达到62%，因酒精死亡人数约70.9万，占据世界首位[2]。长期慢性酒精的有害使用会导致饮酒者出现情绪、记忆、运动等功能以及躯体器官的损害，对个体健康及社会安全带来危害，引起严重社会问题[3,4,5,6]。酒精中毒会导致中枢神经系统由激发态变为抑制性，会增加神经元坏死或凋亡，然而慢性酒精暴露大脑出现皮层神经元萎缩、减少，树突分支退化、丢失等特征表现，其中海马和大脑皮层尤其容易受到影响。慢性酒精中毒后血液中脂多糖水平升高[7]，脂多糖作为NF-κB活化的刺激信号，激活NF-κBp56，增强TNF-α、IL-1β的基因转录，使IL-6 、IL-8 、过氧化氢等炎症因子产生和释放增多，加重神经细胞损伤[8,9]；同时诱导小胶质细胞内p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)活性增强；Bax，Bak促凋亡蛋白表达增加，Bcl-2抗凋亡蛋白表达被抑制，导致Caspase-3表达上调，增加神经细胞凋亡[9,10]。另一方面酒精可直接作用于神经元，破坏神经元细胞内离子稳态[11]；神经细胞内Ca2＋稳态失衡被认为可能是导致神经元自噬的发生的原因之一[12,13]，而神经细胞内Ca2＋稳态主要依靠线粒体及内质网的缓冲作用，酒精直接作用于神经细胞导致线粒体破坏，引起内质网应激，从而导致神经细胞Ca2＋稳态失衡[11]，诱导凋亡发生。3-正丁基苯酞(DL-3-n-Butylphthalide，NBP)是一种从芹菜籽提取物[14,15]。既往研究显示NBP可以减少神经元损失、恢复神经突触蛋白表达，增加了神经保护因子、脑源性神经营养因子[16]；并且可以保护线粒体，减少氧化应激，从而减少神经细胞凋亡的发生[17]；在神经系统损伤的急性期具有很好的保护性作用，并可以有效改善脑损伤所致情绪及认知功能改变[15]。本研究主要通过慢性酒精中毒的小鼠模型[18,19]，以及酒精对神经细胞直接干预，探索NBP是否可保护神经细胞并改善酒精中毒模型小鼠情绪记忆及其作用的机制。
