随着扩大标准供者(Expanded criteria donors，ECD)捐献器官的推广应用，供肝的数量明显增加，但是肝移植术后早期移植物功能障碍(EAD)的发生率也随之增加。EAD往往提示肝移植受者术后预后不良。国外研究显示，伴随着ECD的推广，EAD的发生率提升到了23.7%^[1,2,3]。有研究显示，EAD的发生主要与供肝的冷缺血时间(CIT)^[4]、供者原发性疾病(如有无脂肪肝及脂肪肝的严重程度^[5,6])以及供者年龄^[7]等因素相关。如何在移植之前对供肝进行准确的质量评估，识别出ECD供肝，减少ECD供肝的应用，对预防肝移植术后EAD的发生有极其重要的意义。因此，供肝质量评估关系着肝移植的成败，供肝质量评估的需求日益紧迫。因此，本实验中我们主要针对激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)在评估供肝质量中的应用进行探索。

肝移植是治疗终末期肝病及急性肝功能衰竭最有效的手段^[8,9]。随着近年来扩展供者标准的推广，患者术后早期移植物功能障碍的发生率升至23.7%^[1,2,3]。供肝的质量关系着移植的成败。早期移植物功能障碍主要与供肝的长时间冷缺血^[10]有关，如何进行有效、准确评估供肝因长时间的冷缺血而产生的损伤显得尤为重要。因此亟需一种简便快捷的技术来准确的评估供肝的质量。

供肝的质量主要与以下几个因素有关，分别是：供者原发性疾病(尤其是有无脂肪肝及脂肪肝的严重程度)、供者年龄及供肝的冷缺血时间^[4,5,6,7]。有研究表明，在经历长时间的冷缺血保存后，供者肝脏的代谢已经发生了变化，在对供者肝脏的代谢组学研究后，研究者发现，乳酸浓度(lactate content)是唯一可以独立预测EAD的指标^[11]。在我们的研究中，随着冷缺血的时间的不断延长，LDH与供肝质量的相关性比ALT和AST更高，能更好的指示肝脏质量。而葡萄糖可在LDH的催化下产生乳酸^[12]，乳酸浓度的升高也伴随着LDH的表达和活性的增加^[13]。同时，也有研究显示，长时间的缺氧可对细胞和组织造成损伤，并且这种损伤是以LDH的释放作为标志^[14]。随着冷缺血时间的延长，组织缺氧状态逐渐加重。此时可出现少量细胞损伤甚至死亡，部分LDH释放入保存液中。但是若再进一步延长冷缺血时间，组织细胞缺氧状况越发严重，细胞膜广泛破裂，存在于细胞浆中的LDH大量释放，保存液和灌洗液中LDH的含量显著上升。因此在本实验中，无论在保存液组还是灌洗液组，CIT2 4h组的LDH的含量都显著升高且CIT24 h组和CIT1 h组相比，其差异具有显著的统计学意义。但是，LDH广泛分布于各种组织细胞中，所以LDH的特异性不如ALT和AST高。

其次，激光共聚焦显微镜在2007年的时候首次证明了体内肝脏表面的实时成像是可行的^[15]。此后，关于LSCM在体肝脏观察的应用越来越多，但是还少有在离体肝脏上的应用。本实验将LSCM技术应用在离体肝脏上的观察，并且随着冷缺血时间的延长，LSCM的观察结果也随之改变。保存时间较短(CIT1 h和CIT6 h)，肝脏损伤较小，LSCM能观察到清晰的组织微观结构；保存时间较长(CIT12 h和CIT24 h)，肝脏损伤较大，LSCM对肝脏显微结构的观察结果不甚理想甚至无法观察，无法清晰的辨别肝脏组织的微观结构。LSCM的观察结果和肝组织病理结果有着很好的对应性。但是LSCM在离体肝脏上的应用也是有很多缺陷与不足的，如离体肝脏缺少可做参照的红细胞^[15]，因此组织的辨识度与成像效果要弱于在体肝脏的观察，而且组织微观结构的辨识不如肝组织病理检查结果那样清晰、全面，有很多组织结构比如小胆管结构等无法很好的观察。

因此，将LSCM技术应用在离体肝脏组织的评估上是完全可行的，并且出色的时效性和简单易操作将会成为LSCM技术的一个尤为重要的优势与特点。肝功能的相关检查指标分析后显示，LDH相比AST与ALT而言，能更好的预示肝脏的质量。