实验研究
基因沉默缺氧诱导因子-1α对BxPC-3细胞株糖酵解基因表达的影响
中华实验外科杂志, 2012,29(11) : 2211-2214. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2012.11.037
摘要

目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达对于缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株中糖酵解相关基因表达的影响.方法 通过合成小于扰RNA((siRNA))转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0%O2)和缺氧环境(0.5%~1.0% O2)中培养48 h后,检测各组细胞中糖酵解相关基因[如丙酮酸激酶1(PDK-1)、乳酸脱氢酶A(LDH-A)和柠檬酸合成酶(CS)]的表达以及细胞糖酵解产物乳酸含量的改变.结果 与正常环境比较,缺氧培养后sh-HIF-1α组细胞内HIF-1αmRNA增加了12.4%,蛋白增加了1.6倍,显著低于BxPC-3组和GFP组(P<0.05),PDK-1和LDH-A的表达也明显低于两个对照组(P<0.05).相应的sh-HIF-1α组的乳酸含量为(4.8 ±0.3)nmol/106个细胞,明显低于BxPC-3组(9.1±0.5)nmol/106个细胞和GFP组(9.2±0.5) nmol/106个细胞(P<0.05).相反,缺氧时BxPC-3组和GFP组细胞中与线粒体氧化磷酸化相关的CS基因表达明显下降,低于其在sh-HIF-1α组细胞中的表达(P<0.05).结论 缺氧可以诱导BxPC-3细胞株中HIF-1α基因高表达并促进糖酵解相关的PDK-1和LDH-A等基因表达.而通过沉默HIF-1α基因,可以抑制上述基因的表达,并促进CS基因表达,从而抑制肿瘤细胞的糖酵解代谢。

引用本文: 蒋奕, 吴国豪, 何国栋, 等.  基因沉默缺氧诱导因子-1α对BxPC-3细胞株糖酵解基因表达的影响 [J] . 中华实验外科杂志,2012,29( 11 ): 2211-2214. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2012.11.037
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