泌尿外科
微小RNA-143和微小RNA-29a对膀胱癌细胞的影响及其与Ras相关结构域家族1A基因甲基化的关系
中华实验外科杂志, 2014,31(12) : 2693-2696. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.12.019
摘要

目的 观察微小RNA(miR)-143和miR-29a对T24膀胱癌细胞株生长、侵袭能力的影响,并探讨其与Ras相关结构域家族1A(RASSF1A)基因甲基化的关系.方法 化学合成miR-143和miR-29a的模拟物(mimics),并转染T24膀胱癌细胞株.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证miRNA mimics的转染效果.根据转染mimics的不同,分为WT组(不作任何处理的T24细胞)、NC组(转入不含miRNA的mimics的阴性对照)、M1组(转入含miR-143的mimics)、M2组(转入含miR-29a的mimics).利用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞周期改变,Transwell法检测细胞侵袭能力,RT-PCR和Western blot检测RASSF1A基因转录水平和蛋白质表达,甲基化特异性PCR(MSP)检测RASSF1A基因甲基化状态.结果 RT-PCR证实两组mimics转染成功.WT、NC、M1和M2组的细胞凋亡率分别为2.5%、3.4%、12.4%和13.3%.M1和M2组S期细胞有所增加.NC、M1和M2组细胞侵袭抑制率分别为2.0%、16.5%和13.2%,M1和M2转染组高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR和Western blot检测显示,转染miR-29a的M2组RASSF1A基因转录水平和蛋白质含量较NC组增加,但与M1组比较差异无统计学意义(P>0.05).MSP检测结果显示,WT、NC和M1组RASSF1A基因均呈完全甲基化,M2组呈部分甲基化状态.结论 转染miR-143和miR-29a可使T24膀胱癌细胞株细胞凋亡增加、侵袭能力减弱.转染miR-29a可以部分抑制RASSF1A基因甲基化,从而使该基因转录水平和蛋白质表达增加。

引用本文: 朱延军, 王国民, 徐志兵, 等.  微小RNA-143和微小RNA-29a对膀胱癌细胞的影响及其与Ras相关结构域家族1A基因甲基化的关系 [J] . 中华实验外科杂志,2014,31( 12 ): 2693-2696. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.12.019
参考文献导出:   Endnote    NoteExpress    RefWorks    NoteFirst    医学文献王
扫  描  看  全  文

正文
作者信息
基金 0  关键词  0
English Abstract
评论
阅读 0  评论  0
相关资源
引用 | 论文 | 视频