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冠状动脉旁路移植术(CABG)是治疗冠心病的最有效方法,但静脉移植术后有较高的狭窄闭塞率,严重影响CABG的近、远期效果[1]。本研究旨在建立改良吻合法的新西兰兔静脉动脉化的动物实验模型。
显微外科器械1套、8-0 prolene显微外科缝合线若干,小动物呼吸机及超声流量仪各1台。清洁级新西兰兔40只,其中改良法吻合30只,常规吻合组10只,雌雄不拘,体重(3.0±0.3) kg。购自中国医学科学院阜外医院实验动物中心。
实验动物兔以1%戊巴比妥钠3 ml/kg静脉麻醉,气管插管,使用小动物呼吸机。仰卧位,取颈前正中线切口,于皮下胸锁乳突肌外缘锐性游离右侧颈外静脉,结扎分支、用肝素钠生理盐水灌注管腔,备用。锐性游离左侧颈总动脉约2~3 cm。于中间切断,以8-0无损伤缝线将移植静脉远心端与颈总动脉近心端、移植静脉近心端与颈总动脉远心端连续端端吻合。吻合时用两根8-0无损伤缝线牵拉吻合口,既作为缝合线又作为牵引线,在动脉及静脉吻合口处放入1.5 mm的分流栓,用连续缝合方法完成吻合。吻合完成后,常规使用超声流量计测量血管流量。术后每日肌肉注射青霉素钠3 d预防感染。
数据以均数±标准差(±s)表示,应用SPSS 15.0统计软件分析,两组间采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
改良法建模30只,手术死亡3只。术后静脉桥充盈良好,搏动有力。流量50~100 ml/min。手术时间40~60 min。常规组建模10只,死亡2只,手术时间为80~100 min,与改良组比较,差异有统计学意义(P<0.05),流量为20~35 ml/min,与改良组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。改良法4周后从原切口解剖出静脉桥血管及对侧颈外静脉,肉眼观静脉桥血管均不同程度的膨胀增粗,管腔变硬。用超声流量仪测量静脉桥血管的流量,静脉桥通畅率为100%。剪开桥血管内未见明显血栓形成。大体可见静脉桥管壁均不同程度增厚,管腔狭窄。术后4周静脉桥苏木素-伊红染色较正常组内膜增生明显。电镜显示4周后静脉桥内膜内皮细胞破坏较多。
实验性自体静脉移植动物模型较多,血管桥主要为颈外静脉或大隐静脉,移植部位多在颈动脉、腹主动脉或股动脉,常用的建立模型方法多为"吻合法"及"套管法"。使用套管法时,由于套管内径较细,移植血管容易闭塞。常规吻合方法使用间断吻合,每一针都需要打结,耗时且易出血,导致建模失败。此改良吻合法主要改进:(1)使用临床常用的分流栓(直径1.5 mm),明显缩短了吻合时间;(2)采用静脉两点固定方法,先连续吻合完一侧的一半后,翻转静脉,再吻合另一半;明显提高了吻合效率;(3)术后使用流量计测量吻合血管的通畅情况,并可以记录血管流量。此改良吻合方法吻合后,与常规吻合法比较,明显缩短了吻合时间,近期静脉桥的通畅率良好。
本研究结果表明采用改良"吻合法"建立新西兰兔的自体静脉移植动脉化模型,方法简单,能较真实反映冠状动脉旁路术后静脉桥狭窄。