• 实验研究 •
内皮祖细胞血管化大鼠肝脏脱细胞支架的研究
中华实验外科杂志, 2018,35(7)
: 1238-1240. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2018.07.013
摘要
目的
制备大鼠肝脏脱细胞支架及原代培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞，用内皮祖细胞血管化大鼠肝脏脱细胞支架。
方法
采用灌注法制备大鼠肝脏脱细胞支架，苏木素-伊红(HE)染色法、免疫组织化学检测脱细胞支架结构及成分；原代培养并鉴定大鼠骨髓源性内皮祖细胞，并通过CD31、CD133、血管内皮生长因子(VEGF)免疫荧光鉴定；构建循环灌注培养体系；采用经门静脉途径将内皮祖细胞种植于脱细胞支架内，行体外循环灌注培养，通过HE和CD31检测内皮祖细胞在支架内生长情况。
结果
采用灌注法获得大鼠肝脏脱细胞支架，HE未见细胞核成分，同时可见细胞外基质成分保留，免疫组织化学显示I型胶原蛋白、层粘连蛋白保留；原代培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞CD31、CD133、VEGF免疫荧光阳性；构建出由蠕动泵、氧合器、培养瓶、输送管道组成的循环灌注培养体系；成功将内皮祖细胞通过门静脉途径种植到脱细胞支架内，HE、CD31显示内皮祖细胞定植于脱细胞支架管腔内壁。
结论
通过循环灌注培养能够成功将原代大鼠内皮祖细胞种植于大鼠肝脏脱细胞管腔内壁。
引用本文:
王雷,
周鹏成,
王尧,
等.
内皮祖细胞血管化大鼠肝脏脱细胞支架的研究
[J]
. 中华实验外科杂志, 2018, 35(7)
: 1238-1240.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2018.07.013.
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脱细胞支架相对于人工合成聚合物支架来说保留了完整的脉管结构。内皮祖细胞(EPCs)来源于骨髓或其他组织，表现出一系列非成熟内皮细胞的特征，大量的实验表明内皮祖细胞在损伤血管的部位分化成内皮细胞而完成血管修复或再生。我们采用灌注的方法获得大鼠肝脏脱细胞支架将内皮祖细胞种植于脱细胞支架内，采用循环灌注培养，完成肝脏脱细胞支架的内皮化。
