罗广承; 陈一衍; 王新君; 陈培杰; 肖一鸣; 马红

doi:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.04.033

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• 实验研究 •

糖尿病膀胱病大鼠膀胱Cajal间质细胞丙酮酸激酶表达及活性改变

中华实验外科杂志, 2019,36(4) : 692-694. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.04.033

摘要

目的

检测糖尿病膀胱病(DCP)大鼠膀胱Cajal间质细胞(ICCs)丙酮酸激酶(PKM)的表达和活性，探讨其在DCP发病机制中的作用。

方法

40只雌性SD大鼠，9只为正常对照组；31只以腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型，18只建立成功；9只糖尿病大鼠继续饲养12周，建立DCP大鼠。对照组、糖尿病组、DCP组大鼠分别取膀胱肌层ICCs细胞培养，Western blot及定量PCR法检测PKM蛋白和mRNA，并进行PKM活性测定。

结果

DCP组大鼠膀胱ICCs细胞内PKM蛋白、mRNA、活性值分别为(0.537±0.015)、(0.624±0.026)、(0.098±0.010) U/g蛋白；而糖尿病和对照组大鼠分别为(0.722±0.026)、(0.739±0.045)、(0.178±0.017) U/g蛋白与(0.923±0.031)、(1.000±0.022)、(0.277±0.030) U/g蛋白；DCP大鼠ICCs细胞内PKM表达及活性值较糖尿病组及对照组明显下降(P<0.01)。

结论

膀胱ICCs细胞内PKM活性下降是DCP发生发展的重要机制之一。

引用本文: 罗广承, 陈一衍, 王新君, 等. 糖尿病膀胱病大鼠膀胱Cajal间质细胞丙酮酸激酶表达及活性改变 [J] . 中华实验外科杂志, 2019, 36(4) : 692-694. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.04.033.

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糖尿病膀胱病(DCP)是糖尿病常见的慢性并发症之一，主要表现为膀胱感觉减退，逼尿肌舒缩功能损害。研究证实，人类及大鼠等动物的膀胱黏膜下层及膀胱逼尿肌中亦存在类似肠道Cajal间质细胞的一种特殊间质细胞(ICCs)，是膀胱自主节律的起搏点，起到调节膀胱舒缩功能的作用^[1,2]。膀胱ICCs细胞减少或功能减退是DCP发生发展的一个重要的病理生理学机制^[3]。研究表明DCP豚鼠膀胱ICCs细胞数量减少，细胞核皱缩，线粒体减少、空泡化，细胞突触变少等结构改变^[4,5]。本研究旨在观察糖代谢过程中的关键限速酶——丙酮酸激酶(PKM)在DCP大鼠膀胱ICCs的表达与活性改变，探讨其在DCP发生发展中的作用。

贡献者信息

罗广承

厦门大学附属中山医院泌尿外科　福建医科大学教学医院　361004

陈一衍

厦门大学附属中山医院泌尿外科　福建医科大学教学医院　361004

王新君

厦门大学附属中山医院泌尿外科　福建医科大学教学医院　361004

陈培杰

厦门大学附属中山医院泌尿外科　福建医科大学教学医院　361004

肖一鸣

厦门大学附属中山医院泌尿外科　福建医科大学教学医院　361004

马红

厦门大学附属中山医院内分泌科　福建医科大学教学医院　361004

通信作者

马红

厦门大学附属中山医院内分泌科　福建医科大学教学医院　361004

Email：mah-169@163.com

关键词

糖尿病膀胱病; 丙酮酸激酶; Cajal间质细胞;

基金项目

福建省自然科学基金（2015J01538）

利益冲突

利益冲突　所有作者均声明不存在利益冲突

历史

出版日期：2019-04-08

收稿日期：2018-08-21

Experimental Study

Expression and activity of pyruvate kinase in bladder interstitial cells of cajal in rats with diabetic cystopathy

Guangcheng Luo, Yiyan Chen, Xinjun Wang, Peijie Chen, Yiming Xiao, Hong Ma

Published 2019-04-08

Cite as Chin J Exp Surg, 2019, 36(4): 692-694. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.04.033

Abstract

Objective

To investigate the expression and activity of pyruvate kinase in interstitial cells of Cajal (ICCs) in the bladder of rats with diabetic cystopathy (DCP).

Methods

Forty 8-week-old female rats were divided into two groups randomly, 31 as the experiment group and the rest 9 as the control group. The experiment group was intraperitoneally injected with streptozotocin (STZ) to establish diabetic models and 18 rats were succeeded to be induced. Nine diabetic rats were further raised for 12 weeks getting DCP rats. ICCs from bladder muscle were cultured. The expression of pyruvate kinase protein and mRNA was detected by Western blotting and real-time quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR) respectively, and pyruvate kinase activity was measured.

Results

The expression levels of pyruvate kinase protein and mRNA and activity in DCP rats were reduced significantly as compared with those of the diabetic rats and control rats [(0.537±0.015), (0.624±0.026), (0.098±0.010) U/g·prot respectively, vs. (0.722±0.026), (0.739±0.045), (0.178±0.017) U/g·prot, vs. (0.923±0.031), (1.000±0.022), (0.277±0.030) U/g·prot; P<0.01].

Conclusion

The reduction of pyruvate kinase activity in ICCs may play an important role in the development of DCP.

Key words:

Diabetic cystopathy; Pyruvate kinase; Interstitial cells of cajal

Contributor Information

Guangcheng Luo