近年来脊髓损伤研究成为热点，诞生了诸多组织工程材料，大多数由于细胞相容性导致失败。本研究旨在观察自聚合肽与细胞增殖、分化。

取出生24～72 h乳鼠[浙江省立同德医院伦理审批，动物合格证编号为SYXK(浙)2014-0003]脑皮质，杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)/F12培养基＋碱性成纤维细胞生长因子(bFGF，20 μg/L)＋表皮生长因子(EGF，20 μg/L)＋B27(2%)培养，检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平。10 mg多肽溶解于400 μl 0.1 mol/L NaOH溶液，调节肽浓度为1wt% (10 g/L)，pH 9.0，处于自聚合临界点，透射和扫描电镜观察。盖玻片滴加200 μl 1%wt肽和200 μl培养基，形成凝胶。实验组：分A1及A2亚组，细胞接种至凝胶；对照组：分B1及B2亚组，细胞接种至盖玻片。A1及B1亚组采用无血清培养；A2及B2亚组加入1%胎牛血清。接种7 d测定核因子(NF)、GFAP表达。观察细胞增殖与分化。

1．镜下呈圆形。24 h后密集，2 d呈细胞球。4 d成团。贴壁3 h Nestin(＋)；3 d分化NSE(＋)及GFAP(＋)。

2．DMEM/F12加入1%wt肽，凝胶黏附瓶壁。10%wt肽呈蜂窝状。0.5%、1.0%、2.0%wt肽呈树枝状。

3．实验组形成突触；对照组：血清组7 d见突触，无血清组无分化。激光共聚焦显微镜示实验组：3 d后Nestin(＋)，绿色荧光，7 d分化，GFAP(＋)及NF(＋)，红色荧光。对照组：无血清组，7 d细胞成团，无分化，Nestin(＋)，绿色荧光，未见突触；血清组，7 d分化GFAP(＋)及NF(＋)，绝大部分红色荧光，少量绿色荧光。

组织工程材料可有效促进种子细胞存活及神经分化。天然及人工合成材料细胞相容性差、不能完全模仿脊髓的三维结构，不适用于脊髓组织工程。多肽类细胞外基质可支持细胞的黏附、增殖、分化和突触再生。在培养基触发下自聚合为凝胶，黏弹性较好，适合制作成支架。本研究结果证实自聚合多肽有良好的黏弹性，超微呈树枝状，有助于细胞增殖、迁移、分化。本实验仅为材料的体外研究，体内移植及相关机制还有待进一步研究^[1]。