肝脏外科
藤梨根提取物通过微小RNA-34-5p调控肝癌细胞生物学行为
中华实验外科杂志, 2019,36(10) : 1762-1765. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.10.010
摘要
目的

观察藤梨根提取物(RAE)对肝癌细胞生物学行为的影响并研究其机制。

方法

将HCCLM3细胞细胞分组为miR-NC(转染miR-NC)、miR-34-5p(转染miR-34-5p mimics)、RAE +anti-miR-NC(转染anti-miR-NC)、RAE +anti-miR-34-5p组(转染anti-miR-34-5p),实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞中miR-34-5p的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、膜棕榈糖基化蛋白2(MPP-2)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭,采用SPSS 12.0统计软件分析,多组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验。

结果

与Con组比较,RAE(1、10、100 mg/L)可呈浓度依赖性显著抑制肝癌细胞的增殖(F=421.057、625.513、676.701、578.243、880.710和206.608,均P<0.05),且最适浓度为10 mg/L;RAE可抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,并下调bcl-2、MPP-2,上调miR-34-5p、bax、E-cadherin的表达(t=10.663、26.885、19.270、224.478、46.317和45.388,均P<0.05);过表达miR-34-5p具有与RAE对肝癌细胞相同的作用,抑制miR-34-5p可逆转RAE对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭抑制和凋亡促进作用(F=34.118、286.677、253.530、123.103、103.396和109.770,均P<0.05)。

结论

RAE可抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,其机制与上调miR-34-5p相关。

引用本文: 马慧利, 任中海, 李明林, 等.  藤梨根提取物通过微小RNA-34-5p调控肝癌细胞生物学行为 [J] . 中华实验外科杂志,2019,36 (10): 1762-1765. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.10.010
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藤梨根具有清热解毒及抗肿瘤等功能,在临床上的应用日益受到重视[1]。微小RNA(miRNA,miR)在肿瘤中可作为致癌基因或抑癌基因发挥调控作用,可受多种中药的调控,在疾病的进程中进行调控[2,3]。miR-34-5p在肝癌中已有相关报道,具有抑癌基因作用[4]。藤梨根的抗癌功能的机制是否与miR-34-5p相关,尚且未知。本研究拟以肝癌细胞HCCLM3为研究对象,观察藤梨根提取物(RAE)、过表达miR-34-5p、抑制miR-34-5p对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。

 
 
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