• 论著 •
猪膀胱平滑肌细胞的体外培养及鉴定
国际泌尿系统杂志, 2019,39(6)
: 1064-1067. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2019.06.028
摘要
目的
探讨猪膀胱平滑肌细胞的体外分离、培养、增殖及鉴定的方法，为猪膀胱平滑肌细胞作为构建组织工程细胞的可行性提供实验依据。
方法
选择4只滇南小耳猪，在无菌条件下切取猪膀胱组织，仔细分离膀胱平滑肌层，利用混合酶消化法获取膀胱平滑肌细胞，在DMEM/F12培养基中加入10%胎牛血清，观察细胞形态改变，生长及增殖过程，并利用免疫组织化学染色法鉴定细胞。
结果
体外培养的细胞可融合成片，倒置相差显微镜下观察细胞为长梭形，并且表现出典型的"谷和峰"的形态，通过HE染色符合平滑肌细胞形态特征，平滑肌肌动蛋白染色呈阳性。
结论
采用体外培养方法能够在体外大量培养出高纯度猪膀胱平滑肌细胞，猪膀胱平滑肌细胞可作为种子细胞用于构建组织工程膀胱。
引用本文:
韦海荣,
左毅刚,
丁明霞,
等.
猪膀胱平滑肌细胞的体外培养及鉴定
[J]
. 国际泌尿系统杂志,2019,39
(6): 1064-1067.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2019.06.028
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先天性膀胱畸形、外伤、结核感染和肿瘤等疾病都可引起膀胱结构及功能受损，其中膀胱肿瘤是最常见的诱因，根治性膀胱全切后重建下尿路能够有效治疗肌层浸润性膀胱癌。原位尿流改道已成为膀胱全切后下尿路重建的主要治疗手段。但目前最常用的新膀胱储尿囊是肠道，这使本来局限于泌尿系统疾病的外科治疗严重损伤了消化系统，可带来营养不良、代谢紊乱、肾盂肾炎、储尿囊黏液堵塞和新膀胱肿瘤等并发症[1]。随着近几年组织工程学的发展和具有良好组织相容性材料的出现，使得构建组织工程膀胱有了可能性[2,3,4,5,6]。选取适当的体外培养方法方能够获得数量大且纯度高的种子细胞。目前将猪作为动物模型取其膀胱平滑肌细胞用于体外培养的相关研究报道尚少，本实验通过猪膀胱平滑肌细胞的体外培养方法，为构建组织工程膀胱的研究提供实验依据。
