生士凤; 苟蓉; 陈军童; 王瑞强; 房豫东; 于露; 王刘伟; 唐琳

doi:10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2016.02.008

点赞 0
分享 0
收藏 0
纠错

• 基础研究 •

缺氧诱导因子1α-肾损伤分子1信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞细胞外基质降解的影响

中华肾脏病杂志, 2016,32(2) : 126-131. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2016.02.008

摘要

目的

研究缺氧诱导因子1α（HIF1α）-肾损伤分子1（KIM1）信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞（HK2）细胞外基质降解的影响，探讨HIF1α-KIM1通路参与糖尿病肾病肾间质纤维化（RIF）的可能机制。

方法

体外培养人近端肾小管上皮细胞系（HK2），按如下处理分组:（1）正常对照组（D-葡萄糖5.6 mmol/L）；（2）甘露醇组（D-葡萄糖5.6 mmol/L+D-甘露醇24.4 mmol/L）；（3）高糖组（D-葡萄糖30 mmol/L）；（4）转染对照组；（5）HIF1α siRNA组；（6）KIM1 siRNA组。分别于培养12、24、36 h收获细胞。用Western印迹、实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和细胞免疫荧光方法检测细胞HIF1α、KIM1、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶抑制物1（TIMP1）、纤维连接蛋白（FN）及Ⅰ型胶原（COL-I）等蛋白及mRNA的表达。

结果

与正常对照组相比，高糖组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性增加（均P<0.01)；MMP9蛋白及mRNA表达呈时间依赖性减少（均P<0.01）。与高糖组相比，HIF1α siRNA组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达明显减少（均P<0.01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（P<0.01）。与高糖组相比，KIM1 siRNA组细胞KIM1、TIMP1、FN及COL-I蛋白及mRNA表达明显减少（均P< 0.01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（均P<0.01），而HIF1α表达水平的差异无统计学意义（P>0.05）。

结论

高糖环境下HIF1α可能通过调控肾小管上皮细胞KIM1的表达参与糖尿病肾病肾间质纤维化的进程。

引用本文: 生士凤, 苟蓉, 陈军童, 等. 缺氧诱导因子1α-肾损伤分子1信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞细胞外基质降解的影响 [J] . 中华肾脏病杂志, 2016, 32(2) : 126-131. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2016.02.008.

参考文献导出: Endnote NoteExpress RefWorks NoteFirst 医学文献王

扫描看全文

正文

作者信息

基金 0 关键词 0

English Abstract

阅读 0 评论 0

相关资源

引用 | 论文 | 视频

版权归中华医学会所有。

未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。

除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。

糖尿病肾病（DN）是导致终末期肾脏病（ESRD）的主要原因之一，进行性肾间质纤维化（RIF）是DN进展的重要病理基础，但RIF的发生机制目前尚未完全阐明。国内外相关研究表明，缺氧诱导因子1α（HIF1α）可与肾损伤分子1（KIM1）启动子区缺氧反应原件结合并激活KIM1的表达。HIF1α、KIM1均与肾间质纤维化密切相关^[1,2,3,4]。但有关HIF1α-KIM1信号通路与DN的相关研究甚少。我们用体外高糖培养人近端肾小管上皮细胞（HK2）的方法，观察HIF1α、KIM1及细胞外基质相关指标基质金属蛋白酶9（MMP9）、金属蛋白酶1组织抑制物（TIMP1）、纤连蛋白（FN）以及I型胶原蛋白（COL-I）的表达水平，并应用siRNA转染技术分别下调HIF1α、KIM1的表达后，观察细胞MMP9、TIMP1、FN及COL-I的变化，旨在探讨HIF1α-KIM1信号通路在糖尿病肾病RIF中的作用。

贡献者信息

生士凤