探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症体在对比剂所致肾小管上皮细胞凋亡过程中的作用及其相关机制。
将传代培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）随机分为5组：对照组（Con组）；碘海醇组（O组）；NLRP3基因沉默+碘海醇组（si-NLRP3+O组）；凋亡相关斑点样蛋白（ASC）基因沉默+碘海醇组（si-ASC+O组）；甘露醇组（M组）。将不同浓度的低渗对比剂碘海醇加入HK-2细胞培养皿中分别孵育24、48、72 h。流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡；RT-PCR法检测细胞内NLRP3、ASC mRNA相对表达量；Western印迹法检测HK-2细胞内NLRP3、ASC、凋亡相关调控蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8（caspase-8）/活化型caspase-8（cleaved caspase-8）、B细胞淋巴瘤2蛋白（Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bax）、caspase-1/cleaved caspase-1、caspase-3/cleaved caspase-3蛋白相对表达量；ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素（IL）1β、IL-18水平。
与对照组相比，碘海醇组HK-2细胞凋亡率升高；细胞内NLRP3、ASC mRNA相对表达量增多；NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白相对表达量增多；细胞上清中IL-1β、IL-18含量升高（均P<0.05）。提示碘海醇组HK-2细胞NLRP3炎症体被激活。与对照组相比，碘海醇组促凋亡蛋白cleaved caspase-8、Bax、cleaved caspase-3表达量增多；抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低（均P<0.05）。与碘海醇组相比，si-NLRP3+碘海醇组、si-ASC+碘海醇组HK-2细胞凋亡率显著降低；cleaved caspase-1表达量减少；促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3表达减少；抗凋亡蛋白Bcl-2表达量增多；细胞上清中IL-1β、IL-18含量降低（均P<0.05）。
对比剂可激活HK-2细胞中NLRP3通路，诱导细胞凋亡，阻断NLRP3通路可减轻细胞凋亡。
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随着血管介入治疗和造影检查技术的广泛应用，对比剂所致急性肾损伤（contrast induced acute kidney injury，CI-AKI）已成为院内获得性急性肾损伤的第三大原因[1,2]。对比剂可通过多种机制引起急性肾损伤。早期研究认为CI-AKI主要是由对比剂引起肾脏血流动力学改变，肾血管收缩导致肾髓质缺血；和对比剂对肾小管上皮细胞的直接毒性作用造成的[3,4,5]。最近的研究发现，肾脏局部炎性反应参与了CI-AKI的损伤进程[6]。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3[nucleotide-binding oligomerization domain（NOD）-like receptors family，pyrin domain containing 3，NLRP3]是先天性免疫系统中具有代表性的核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族（NLRs）成员，受到刺激活化后招募含有CARD结构域的凋亡相关斑点蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC）与含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（cysteinyl aspartate specific proteinase 1，caspase-1）前体，形成炎性体，活化白细胞介素（IL）1β与IL-18等炎性因子，参与炎性反应[7,8]。本研究旨在探讨NLRP3炎症体在对比剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡过程中的作用及其机制。
