探讨清除肾组织巨噬细胞对补体C3缺失单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化结局的影响及其机制。
8~12周龄的C57BL/6野生型（WT）和补体C3基因敲除（C3KO）小鼠用随机数字表法分为：野生型小鼠假手术组（WT/sham）；野生型小鼠UUO模型组（WT/UUO）；补体C3基因敲除小鼠假手术组（C3KO/sham）；补体C3基因敲除小鼠UUO模型组（C3KO/UUO），每组18只。左侧输尿管结扎法建立UUO模型。免疫组化法检测UUO术后梗阻侧肾组织补体C3的表达；免疫荧光法检测肾间质F4/80阳性巨噬细胞的分布和数量；Masson及HE染色观察肾组织病理改变，比较肾间质胶原纤维面积和肾小管-间质损伤指数评分。分别用巨噬细胞清除剂氯磷酸二钠（CLO）脂质体在UUO早期或晚期处理WT/UUO和C3KO/UUO组小鼠，观察肾间质巨噬细胞数量和肾间质纤维化的改变。F4/80和iNOS免疫双荧光、F4/80和CD206免疫双荧光观察WT/UUO和C3KO/UUO组术后巨噬细胞表型及M1/M2型巨噬细胞的比例。Western印迹法检测肾组织巨噬细胞标志蛋白诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）、甘露糖受体（CD206）的表达。
与WT/UUO组比较，C3KO/UUO组小鼠肾间质胶原纤维面积减少，肾小管-间质损伤指数评分降低（均P<0.01），肾间质纤维化程度减轻。巨噬细胞清除剂早期或晚期处理后，WT/UUO组肾脏纤维化程度均较空白脂质体组减轻；C3KO/UUO组肾脏纤维化程度与空白脂质体组相比无明显改善。C3KO/UUO组早期肾组织M1型巨噬细胞占比及其标志蛋白iNOS较WT/UUO组表达降低，M2型巨噬细胞占比及其标志蛋白Arg-1、CD206表达增加（均P<0.01）。
补体C3基因敲除的UUO小鼠清除巨噬细胞后肾脏纤维化程度无明显改善，其机制与补体C3缺失影响肾组织巨噬细胞极化表型有关。
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巨噬细胞介导的炎性反应及其分泌的细胞因子对肾间质纤维化发挥着重要作用[1]。有学者发现，在以进行性肾小管间质纤维化为特征的小鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型中，清除肾组织巨噬细胞可改善肾纤维化[2,3,4]，并伴有肾脏局部C3表达的减少[4]。在补体C3基因敲除小鼠，或者C3抑制剂、C3a受体拮抗剂干预的UUO模型中，均能观察到肾纤维化程度减轻[4,5]。表明肾脏局部补体C3和巨噬细胞共同了参与肾纤维化的病理过程。补体C3基因敲除的UUO小鼠清除肾组织巨噬细胞后，肾纤维化是否会进一步改善呢？目前尚没有研究报道。巨噬细胞极化为两种不同的活化表型[6]，即经典活化（M1）和替代活化（M2），共同参与了肾组织的损伤与修复[7,8]。组织器官的微环境影响巨噬细胞极化。近年来有报道补体系统调控巨噬细胞表型[9]。本研究通过观察巨噬细胞清除对补体C3基因敲除UUO小鼠肾脏纤维化的影响，检测巨噬细胞极化表型变化，探讨补体C3对巨噬细胞的影响及其在肾间质纤维化中的作用。
