探讨他克莫司通过调节活化T细胞核因子(NFAT)c1促进大鼠创伤性脑损伤(TBI)后神经功能修复的作用。
选择90只SD大鼠，利用液压打击制作大鼠中度TBI模型。按随机数字表分为假手术组、TBI组和他克莫司治疗组。假手术组只接受开颅手术并连续7 d腹腔注射等体积0.9%等渗盐水；TBI组连续7 d腹腔注射等体积0.9%等渗盐水；他克莫司组连续7 d腹腔注射等体积他克莫司(1 mg/kg)。利用改良神经功能评分(mNSS)和水通道蛋白(AQP4)mRNA表达评价神经功能损伤程度。TBI后1，7，14 d采用酶联免疫吸附实验(ELISA)和RT－PCR检测白细胞介素－2(IL－2)、γ干扰素(IFN－γ)蛋白和mRNA表达，RT－PCR、Western blot和免疫荧光检测钙调神经磷酸酶(CaN)和NFATc1信号通路活化情况。
mNSS结果显示，他克莫司治疗组在TBI后1，7，14 d得分显著低于TBI组(P<0.05)，但仍高于假手术组。RT－PCR结果显示，TBI后1 d他克莫司治疗组AQP4 mRNA的表达水平显著降低，但仍高于假手术组。ELISA和RT－PCR结果显示，与TBI组比较，他克莫司治疗组在各时相点IL－2和IFN－γ的mRNA表达水平和蛋白含量均降低，尤以1 d降低最为显著(P<0.05)。RT－PCR和Western blot结果显示，与TBI组比较，他克莫司治疗组TBI后CaN的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示，与假手术组比较，TBI后7 d胞浆中NFATc1显著入核；与TBI组比较，他克莫司治疗组TBI胞浆中NFATc－1的蛋白入核受到抑制(P<0.05)。
他克莫司通过调节NFATc1来抑制炎症反应，减轻中度TBI后脑水肿程度，促进神经功能修复。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)的致残率和病死率均较高，我国TBI患者中约30%～50%死亡[1]。继发性损伤是决定TBI损害范围和程度的重要因素之一，TBI后脑神经细胞内钙超载对继发性脑损伤的发生和发展起着决定性的作用，也是多种情况下细胞死亡的最后共同通路[2,3,4]。目前为止，治疗TBI的方法很多，但效果仍需进一步改善。钙调神经磷酸酶(CaN)是目前所知的唯一依赖Ca2＋/钙调素(CaM)调节的丝氨酸－苏氨酸蛋白磷酸酶，在细胞信号传递过程中直接受Ca2＋的调节，通过其重要底物活化T细胞核因子(NFAT)去磷酸化和核内转位，与DNA的结合活性增加，激活下游基因转录，参与多种细胞的功能调节[5]。其活性被免疫抑制剂他克莫司特异性抑制。他克莫司在器官和细胞移植中被研究并投入使用，目前对于他克莫司通过FKBP12介导的免疫抑制的分子机制已得到广泛认可[6]。虽然他克莫司对于神经生长的促进作用在脊髓损伤、癫痫、脑缺血等许多动物实验中已有了广泛报道[6]，在TBI早期其神经营养和神经保护作用已被证实[7]，但其与NFATc1的相关性尚不明确。尽管NFAT在免疫系统甚至在中枢神经系统(CNS)中的基本功能是转录功能[7]，但是否与NFATc1相关尚未见报道。笔者推测TBI后他克莫司可以通过NFATc1反式作用因子发挥神经修复和保护神经功能的作用。为了验证这一假设，笔者利用液压打击损伤(FPI)模型，观察他克莫司对TBI大鼠神经功能、NFATc1关键蛋白和炎症反应的影响，探讨他克莫司对TBI后神经功能修复的作用机制。
