观察高血压合并急性冠脉综合征(ACS)患者血清抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(AT1–AA)水平及AT1–AA对离体高脂大鼠冠状动脉前降支血管环静息张力影响。
将2007年6月至2008年8月山西省心血管病医院心内科患者分为：高血压合并ACS组(n＝120)、单纯高血压组(n＝253)及单纯ACS组(n＝115例)，同期门诊健康体检者作为健康对照组(n＝188)。合成AT1受体胞外第二环肽段作为抗原(AT1–Ag)，SA–ELISA检测血清AT1–AA水平；微血管环张力技术测定离体大鼠冠状动脉前降支血管环静息张力。
单纯高血压和单纯ACS组血清AT1–AA阳性率均明显高于对照组[(35.2%比7.2%)和(30.4%比7.2%)](均P<0.01)；高血压合并ACS组AT1–AA阳性率明显高于单纯高血压组(43.3%比35.2%, P<0.05)和单纯ACS组(43.3%比30.4%, P<0.05)；AT1–AA可增加离体高脂大鼠冠脉前降支血管环静息张力，其增加血管环静息张力幅度相当于血管紧张素Ⅱ的46.4%，并呈现浓度依赖性；且该收缩血管作用可被氯沙坦及AT1–Ag阻断。
高血压合并ACS患者血清AT1–AA水平显著增高；AT1–AA可增加离体大鼠冠脉前降支血管环静息张力引起的血管收缩效应。
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高血压是急性冠脉综合征(ACS)的重要危险因素。抗血管紧张素Ⅱ1型AT1受体自身抗体(AT1–AA)在高血压患者中显著升高，并可导致相关靶器官的损害和内皮细胞收缩、损伤[1]，提示AT1–AA可能在高血压及其并发症ACS的发病机制中有重要作用。本课题检测高血压合并ACS患者血清AT1–AA阳性率，观察AT1–AA对离体高脂大鼠冠状动脉血管环静息张力的作用，初步探讨AT1–AA在高血压合并ACS中的可能作用。
2007年6月至2008年8月就诊山西省心血管病医院心内科患者及门诊体检者，分为四组：(1)单纯高血压组：253例，平均年龄(58±11)岁，(2)高血压合并ACS组：120例，平均年龄(60±12)岁，(3)健康对照组：188名，平均年龄(55±8)岁，(4)单纯ACS组：115例，平均年龄(59±9)岁。本研究获得医院伦理委员会批准(批准号2007016)，研究对象均知情同意。排除标准：(1)继发性高血压；(2)心肌病；(3)风湿性心脏病；(4)内分泌性疾病；(5)自身免疫性疾病；(6)肿瘤；(7)感染性疾病；(8)应用血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素受体拮抗剂，(9)纽约心功能Ⅲ～Ⅳ级；(10)肝肾功能异常[ALT大于正常上限2倍，血肌酐>177 μmol/L(男)或<146 μmol/L(女)]。研究对象于入院次日用药前抽取肘静脉血5 ml，分离血清后置于–40 ℃保存待测。
体质量200～220 g的8周雄性Wistar大鼠(山西医科大学动物中心)。AT1受体细胞外第二环功能表位肽段(西安美联生物科技有限公司)：I–H–R–N–V–F–F–I–E–N–T–N–I–T–V–C–A–F–H–Y–E–S–Q–N–S–T–L。
采用SA–ELISA技术，检测入选对象血清AT1–AA。每一标本均做复孔测定，实验中分别设立已知空白对照、阳性对照和阴性对照，测定吸光度(A)值时以空白对照调零。
利用IgGs亲和纯化试剂盒(Mab Trap Kit)分别纯化AT1–AA阳性和AT1–AA阴性患者血清IgGs；将上述纯化后的IgGs利用考马斯亮蓝试剂盒进行蛋白质定量，采用ELISA法进行抗体定性：测得IgGs的浓度为2 mg/ml；IgGs的滴度为1∶160。
本研究离体实验选取高脂Wistar大鼠的冠状动脉左前降支进行实验。操作在显微镜下进行。(1)选择体质量200～220 g Wistar大鼠。颈椎脱臼后，取出心脏，浸入4 ℃的生理盐水营养液(physiological salt solution，PSS)中，固定心尖端和升主动脉端，在显微镜下于左心耳下寻找冠状动脉，沿动脉走行钝性分离，于左前降支处剪取2 mm血管环；将血管环固定在Multi Myograph System–610M浴槽内传感器上，浴槽内温度控制在37 ℃、100% O2持续充氧的PSS液5 ml；平衡稳定60 min后开始刺激实验。(2)分组：(每组n＝8)：①不同AT1–AA抗体滴度组(10-6、10-7 、10-8 mol/L)；②阴性IgGs组(阴性对照组)；③血管紧张素Ⅱ组(AngⅡ)；④AT1–AA阳性IgGs组(AT1–AA)；⑤AT1–AA阳性IgGs＋氯沙坦组(AT1–AA/氯沙坦)；⑥AT1–AA阳性IgGs＋AT1–Ag组(AT1–AA/Ag)；⑦AT1–Ag组；⑧氯沙坦组。(3)冠状动脉血管环的张力变化通过DMT的换能系统进行采集。
计量资料用
±s表示，多组均值比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD法；多组率的两两比较采用χ2检验。用SPSS 13.0软件处理，P<0.05为差异有统计学意义。
各组对象一般资料比较：性别、年龄及血脂等差异无统计学意义。单纯高血压组血压和单纯ACS组血压、高血压合并ACS组血压水平，均高于健康对照组血压水平(均P<0.05)。高血压合并ACS组心率，高于健康对照组和单纯高血压组(P<0.05)；单纯ACS组心率显著高于健康对照组(P<0.05)。高血压合并ACS组与单纯高血压组相比，血压水平及高血压病程差异均无统计学意义(P>0.05，表1)。
四组一般临床资料比较(
±s)
四组一般临床资料比较(±s)
| 项目 | 健康对照组(n＝188) | 单纯高血压组(n＝253) | 高血压合并ACS组(n＝120) | 单纯ACS组(n＝115) |
|---|---|---|---|---|
| 性别(男/女) | 98/90 | 146/107 | 72/48 | 67/48 |
| 年龄(岁) | 55±8 | 58±11 | 60±12 | 59±9 |
| 吸烟[(例)%] | 91(48.4) | 136(53.8) | 93(77.5)ab | 90(78.2)a |
| LDL–C(mmol/L) | 2.94±0.54 | 3.02±0.48 | 3.25±0.61 | 3.12±0.32 |
| HDL–C(mmol/L) | 1.01±0.40 | 0.95±0.21 | 0.84±0.36 | 0.88±0.49 |
| TG(mmol/L) | 1.63±0.52 | 1.94±0.44 | 1.89±0.60 | 1.92±0.46 |
| 空腹血糖(mmol/L) | 4.9±1.1 | 5.6±2.2 | 5.7±2.8 | 5.5±2.1 |
| 收缩压(mmHg) | 122±2 | 160±19a | 170±21ac | 126±9a |
| 舒张压(mmHg) | 66±1 | 100±13a | 99±18ac | 76±6a |
| 心率(次/min) | 66±11 | 72±12 | 88±16ab | 86±14a |
| 高血压病程(年) | – | 8±5 | 13±7 | – |
注：1 mmHg＝0.133 kPa；与健康对照组比较，aP<0.05；与单纯高血压组比较，bP<0.05，与单纯ACS组比较，cP<0.05
单纯高血压组和单纯ACS组血清AT1–AA阳性例数分别为89例(35.2%)、35例(30.4%)，阳性率明显高于健康对照组(7.2%，P<0.01)；高血压合并ACS组AT1–AA阳性者52例，阳性率(43.3%)明显高于单纯高血压组(35.2%)和单纯ACS组(30.4%，P<0.05)。
10–7 mol/L和10–6 mol/L组AT1–AA分别使冠脉血管环静息张力由10–8 mol/L的AT1–AA组[(0.33±0.06) mN]，增加到[(0.73±0.07) mN]和[(1.07±0.06)mN]，并呈现浓度依赖性，与10–8mol/L组相比，P<0.01。
(1)与阴性对照组[(0.16±0.07) mN]相比，AT1–AA可显著增加冠脉血管环张力[(1.11±0.21) mN](P<0.01)，以AngⅡ增加的冠状动脉血管环静息张力[(2.40±0.10) mN]作为100%参照，AT1–AA可增加大鼠冠状动脉血管环静息张力约46.4%，显著高于阴性对照组(6.7%)(P<0.01)；(2)AT1–AA/氯沙坦组[(0.13±0.05) mN]血管环张力明显低于AT1–AA组[(1.11±0.21)mN](P<0.01)，而与氯沙坦组[(0.11±0.03)mN]差异无统计学意义；同时AT1–AA/Ag组[(0.18±0.09) mN]血管环张力也明显低于AT1–AA组[(1.11±0.21) mN](P<0.01)，而与AT1–Ag组[(0.16±0.09)mN]差异无统计学意义。
AT1–AA在心血管疾病中具有重要调节作用，参与高血压、心室扩张和心肌细胞、内皮细胞凋亡[1]。本研究高血压合并ACS患者血清AT1–AA检出率显著高于单纯ACS及单纯高血压患者，而且单纯ACS患者AT1–AA检出率显著高于对照组。可能是ACS患者多种生理紊乱导致血管紧张素Ⅱ水平升高，血管内膜和心肌损伤诱导自身耐受被打破或自身抗原暴露，诱导机体产生抗心脏受体自身抗体[2]。AT1–AA出现可能进一步增加心肌再灌注敏感性[3]及心肌重塑[4]，影响ACS患者预后。
AT1–AA可促进内皮细胞损伤及功能障碍[5]。ACS患者动脉粥样硬化的冠脉血管处于一种易损状态，容易痉挛。推测ACS患者冠脉血管易损和功能障碍可能与血清AT1–AA存在有关。在体外研究发现AT1–AA可增加冠状动脉前降支血管环静息张力，引起血管收缩，且呈现浓度依赖性。并且AT1–AA收缩冠状动脉血管的效应可被氯沙坦和AT1–Ag阻断，表明AT1–AA可引起冠状动脉血管收缩，机制可能与刺激血管平滑肌细胞内游离Ca2＋浓度升高有关[1]。动物实验已证实AT1–AA能使血管平滑肌收缩，促进内皮损伤[5]。因此，我们推测高血压合并ACS患者AT1–AA可能导致强烈的血管反应，加上内皮损伤效应，更易增加斑块破裂的风险。
