探讨微滴式数字PCR（DD-PCR）技术检测产前诊断标本母体细胞污染的临床应用价值。
2015年10月至2016年12月间以40例因夫妇双方均为地中海贫血基因βIVS-Ⅱ-654/βN杂合携带者、在广州医科大学附属广东省妇女儿童医院行侵入性产前诊断的孕妇作为观察样本。通过设计特异性引物、探针，建立母体细胞污染程度梯度50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、1.562 5%模型，采用DD-PCR技术及短串联重复序列的荧光定量PCR技术检测产前诊断标本母体细胞污染，分别评估两种检测方法的敏感性；并分别检测40组产前诊断标本，以比较DD-PCR技术与荧光定量PCR技术检测母体细胞污染的准确性。
DD-PCR技术可以检测到产前诊断标本中低至1.562 5%的母体细胞污染，检测结果与母体细胞污染程度梯度改变基本相符，而荧光定量PCR技术只能在母体细胞污染≥6.25%时才提示产前诊断标本存在400 bp的母源性特有峰。DD-PCR技术共检测到6例（15%，6/40）产前诊断标本存在母体细胞污染，荧光定量PCR技术只检测到3例母体细胞污染的产前诊断标本（7.5%，3/40），两种检测方法比较，DD-PCR技术的准确性更高（P=0.002）。
DD-PCR技术可对产前诊断标本进行母体细胞污染精确定量，并具有较高的敏感性，具有良好的临床应用价值。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
目前，侵入性产前诊断的取材方法包括绒毛穿刺取样术、羊膜腔穿刺术和经皮脐血穿刺术等，取材过程中可能附带母体外周血、子宫底蜕膜组织，容易使标本受到不同程度的母体细胞污染(maternal cell contamination，MCC)[1,2]。短串联重复序列(short tandem repeats, STR)的荧光定量PCR(quantitative fluorescent PCR，QF-PCR)技术是检测MCC的主要方法，但该方法只能相对定量，敏感性有限[3]。随着高敏感性基因扩增技术、分子遗传学检测技术的应用，微量的MCC可能干扰产前诊断的检测结果，造成误诊或漏诊[4]。微量的MCC即可影响地中海贫血基因反向斑点杂交技术的检测结果，即原本为βIVS-Ⅱ-654/βIVS-Ⅱ-654纯合的胎儿地中海贫血基因受MCC影响被误诊为地中海贫血βIVS-Ⅱ-654/βN杂合。妊娠早期胎儿细胞较母体细胞少，若产前诊断标本无法排除MCC，很有可能漏诊重型地中海贫血胎儿，给家庭和社会带来沉重负担。QF-PCR技术的敏感性低于常规的反向斑点杂交技术，当地中海贫血基因检测结果受微量的MCC影响时，QF-PCR技术通常不能提示存在MCC。因此临床上迫切需要更高敏感性和准确性的检测方法以排除产前诊断标本中的MCC。微滴式数字PCR（droplet digital PCR，DD-PCR）技术是1种终点测量技术，不需要标准曲线即可完成精确定量[5]；通过将DNA标本分散至1 nl大小的微滴，形成油包水状态后进行普通PCR反应，最后通过微滴读取数据，根据泊松分布及阳性微滴数计算出标本浓度。DD-PCR技术具有高敏感性、高重复性和可检测极微量DNA的特性，在肿瘤液体活检及无创性产前筛查中已被广泛应用[6,7,8,9,10,11]。本研究使用DD-PCR技术检测和精确定量产前诊断标本的MCC，探讨DD-PCR技术检测产前诊断标本MCC的临床应用价值。
