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钙池操纵性钙内流及经典瞬时受体电位蛋白和瞬时受体电位香草酸蛋白在大鼠远端肺静脉平滑肌上的表达
中华结核和呼吸杂志, 2011,34(7) : 514-514. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2011.07.011
引用本文: 彭公永, 卢文菊, 李晓岩, 等.  钙池操纵性钙内流及经典瞬时受体电位蛋白和瞬时受体电位香草酸蛋白在大鼠远端肺静脉平滑肌上的表达 [J] . 中华结核和呼吸杂志, 2011, 34(7) : 514-514. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2011.07.011.
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本研究旨在通过观察远端肺静脉上经典瞬时受体电位(TRPC)通道蛋白和瞬时受体电位香草酸(TRPV)通道蛋白的表达以及钙池操纵性钙内流(SOCE)的水平,探讨慢性低氧对肺静脉平滑肌的影响,从而研究肺静脉平滑肌在低氧性肺动脉高压发病中的作用及其机制。慢性低氧可造成肺动脉和肺静脉的收缩和血管重塑,其中慢性低氧对肺动脉的影响已得到深入的研究,但针对肺静脉的研究目前尚未获得重视。我们的前期研究结果显示,SOCE是低氧性肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞内钙离子失衡的主要原因,并可引起肺动脉收缩和血管重塑。钙池操纵性钙离子通道(SOCC)是一种钙离子通道,主要由瞬时受体电位通道蛋白构成。

通过建立大鼠远端肺静脉平滑肌细胞培养模型,采用实时荧光定量PCR和Western blot法测定TRPC1–7和TRPV1–6在肺静脉平滑肌和原代肺静脉平滑肌细胞上的表达水平。利用荧光染料Fura–2与细胞内游离钙离子结合产生荧光的原理,测定细胞内SOCE水平。

结果显示,在原代培养的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞中瞬时受体电位通道蛋白mRNA表达量依次为:TRPC1>TRPC6>TRPC4>TRPC2≈TRPC5>TRPC3,TRPV2>TRPV4>TRPV1,大鼠远端肺静脉平滑肌上相应蛋白表达量依次为:TRPC1>TRPC6>TRPC3>TRPC4≈TRPC5,TRPV2≈TRPV4>TRPV1。在大鼠远端肺静脉平滑肌和原代培养的肺静脉平滑肌细胞上都存在TRPC1,TRPC6,TRPV2和TRPV4蛋白的表达。原代培养的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞上存在SOCE,可以被200 μmol/L氯化锰淬灭,并可被SOCC的特异性阻滞剂SKF–96365和氯化镍阻滞。本研究结果提示,瞬时受体电位通道蛋白组成的SOCC通道引起的SOCE参与了肺静脉平滑肌细胞内的钙调节。本研究首次全面研究了瞬时受体电位通道蛋白及SOCE在肺静脉平滑肌上的表达,为进一步全面的研究肺动脉高压发病机制提供新的思路。

原文:Expression of store–operated Ca2+entry and transient receptor potential canonical and vanilloid–related proteins in rat distal pulmonary venous smooth muscle. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol(影响因子4.043),2010,299: L621–L630.

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