探讨淋巴细胞白血病缺失基因1(DLEU1)、miR-513a-5p和RANBP2在肾母细胞瘤中的调控作用及机制。
采用脂质体法转染pcDNA(pcDNA组)、pcDNA-DLEU1(pcDNA-DLEU1组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-513a-5p模拟物(miR-513a-5p组)、pcDNA-RANBP2(pcDNA-RANBP2组)、pcDNA-DLEU1＋miR-NC(pcDNA-DLEU1＋miR-NC组)、pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p(pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p mimics组)、miR-513a-5p＋pcDNA(miR-513a-5p mimics＋pcDNA组)和miR-513a-5p＋pcDNA-RANBP2(miR-513a-5p mimics＋pcDNA-RANBP2组)至肾母细胞瘤GHINK-1细胞中。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织、癌旁组织、正常肾细胞HK2和肾母细胞瘤细胞GHINK-1中DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2的表达水平，Western blot检测PCNA、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平，细胞计数试剂盒8法检测细胞的存活率，流式细胞术检测细胞的凋亡率，双荧光素酶报告实验检测细胞的荧光素酶活性。
DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2在癌旁组织中的表达水平分别为1.02±0.08、1.01±0.06和1.00±0.05，与肾母细胞瘤组织(分别为5.16±0.24、0.23±0.02和1.67±0.09)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)；DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2在HK2细胞中的表达水平分别为1.00±0.06、1.00±0.08和1.02±0.09，与GHINK-1细胞(分别为3.15±0.21、0.18±0.01和1.54±0.10)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达DLEU1后，pcDNA组GHINK-1细胞的凋亡率[(12.35±1.12)%]与pcDNA-DLEU1组[(7.35±0.41)%]比较，差异有统计学意义(P<0.05)。过表达RANBP2后，pcDNA组GHINK-1细胞的凋亡率[(12.64±1.12)%]与pcDNA-RANBP2组[(8.89±0.48)%]比较，差异有统计学意义(P<0.05)。miR-513a-5p组DLEU1-WT和RANBP2-WT细胞的荧光素酶活性分别为0.43±0.04和0.61±0.07，与miR-NC组(分别为1.01±0.06和0.99±0.06)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。anti-miR-513a-5p组DLEU1-WT和RANBP2-WT细胞的荧光素酶活性分别为1.34±0.11和1.39±0.13，与anti-miR-NC组(分别为0.99±0.07和0.98±0.05)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。pcDNA-DLEU1＋miR-NC组和pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p组GHINK-1细胞的凋亡率分别为(8.51±0.69)%和(11.34±1.03)%，miR-513a-5p＋pcDNA组和miR-513a-5p＋pcDNA-RANBP2组GHINK-1细胞的凋亡率分别为(15.94±1.00)%和(9.96±0.72)%，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
长链非编码RNA DLEU1可促进肾母细胞瘤细胞的增殖，其机制与靶向调控miR-513a-5p和RANBP2功能有关，可为肾母细胞瘤的治疗提供理论支持。
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长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)和微小RNA(microRNA, miRNA)是非编码RNA(non-coding RNA, ncRNAs)中常见的两种功能性RNA。LncRNA淋巴细胞白血病缺失基因1(deleted in lymphocytic leukemia 1, DLEU1)是在肾母细胞瘤中新发现的ncRNAs[1]。有研究显示，miR-513a-5p与DLEU1存在潜在结合位点[2]。DLEU1在多种恶性肿瘤(肺癌、结肠癌、宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢癌)中均已确定为致癌LncRNA[3,4]，但其在肾母细胞瘤中的功能研究甚少。此外，miR-513a-5p已被证实在乳腺癌中具有潜在致癌作用[2]，但DLEU1和miR-513a-5p在肾母细胞瘤中的功能及相互作用尚不明确。本研究中，我们探讨了LncRNA DLEU1和miR-513a-5p在肾母细胞瘤GHINK-1细胞中的作用及机制。
