单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)是导致人类疱疹性疾病的主要病原体，具有广泛宿主细胞类型、庞大外源基因容量等特点，因此也是一种颇具吸引力的病毒载体。HSV基因组较为庞大，对于病毒基因组的操作技术便成为关键环节。对该病毒基因组的操作先后经历了同源重组(homologous recombination),细菌人工染色体技术(bacterial artificial chromosome, BAC)和CRISPR/Cas9 (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9 )技术。同源重组具有重组效率低、产物不易纯化等缺点，而且将大型病毒基因组克隆到BAC上是一个耗时耗力的过程。近年来，CRISPR/Cas9技术因其操作简便、重复性好、成本低廉等优势而被越来越多的研究者应用于各种物种的基因工程研究工作中，对于病毒基因组的操作也随之更加精确高效。本文对CRISPR/Cas9技术在HSV基因功能、治疗HSV感染性疾病及HSV载体研究中的应用进行综述，以期对相关的研究工作提供一定参考。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)属疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，单纯疱疹病毒属。基于型特异性抗原gG( glycoprotein G )将HSV分为HSV-1和HSV-2两个血清型。其中1型主要引起腰部以上、生殖器以外的皮肤、黏膜、器官和神经系统感染，2型主要引起腰部以下的皮肤疱疹和生殖器疱疹，临床上主要运用抗病毒药物如阿昔洛韦进行治疗，目前尚无有效的疫苗上市。HSV基因组为双链线性DNA，长达152 kb，编码产物达90种以上，然而将近一半的产物对于病毒增殖是非必需的。理论上，HSV-1基因组中近40 kb的DNA序列都是可以被外源基因替换的。此外，其必需基因亦可被删除而由相应的互补细胞或辅助黏粒提供[1]，这便赋予HSV基因组很大的可操作空间，使用CRISPR/Cas9(clustered, regularly interspaced, short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9 )技术可以简单快速的对相对庞大的HSV基因组进行改造，以研究其基因功能、致病机制，进而应用于预防、治疗HSV感染性疾病和HSV载体的研究。
