探讨CCAAT增强子结合蛋白(CEBPB)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达情况及其与ccRCC临床特征的关系，并检测CEBPB基因对ccRCC细胞增殖和侵袭活性的影响。
本研究于2020年3—12月完成。从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载537例ccRCC患者的转录组数据和临床数据。男346例，女191例；≤60岁266例，>60岁271例；G1~2级244例，G3~4级285例，未确定分级8例；T1~2期344例，T3~4期193例；N0期240例，N1期17例，无法评估淋巴结转移情况280例；M0期426例，M1期79例，无法评估远处转移情况32例；生存367例，死亡170例。分析CEBPB mRNA在ccRCC组织中的表达及其与临床特征的相关性；单因素和多因素Cox回归分析CEBPB表达水平对ccRCC患者生存预后的影响；肿瘤免疫浸润评分(TIMER)数据库分析CEBPB表达与免疫细胞浸润的相关性。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测CEBPB mRNA和蛋白在人肾小管上皮细胞株HK2和ccRCC细胞株(Caki-1、ACHN、786O、769P和A498)中的表达；利用脂质体转染ACHN细胞和786O细胞，实验分为对照组、阴性对照siRNA (NC siRNA)组和CEBPB siRNA组。转染后48 h，分别通过MTT实验和侵袭实验检测各组ACHN细胞和786O细胞的增殖和侵袭活性。
TCGA数据库资料分析结果显示，与正常肾脏组织比较，ccRCC组织中的CEBPB mRNA表达水平上调2.55倍(P<0.05)。CEBPB表达水平与ccRCC患者年龄、肿瘤分级、肿瘤分期、淋巴结转移及远处转移呈正相关(P<0.05)，且肿瘤分级(HR＝1.703，P＝0.040)、肿瘤分期(HR＝1.773，P＝0.026)、远处转移(HR＝3.080，P<0.001)和CEBPB高表达(HR＝1.874，P＝0.003)是影响ccRCC患者预后的独立危险因素。TIMER数据库分析结果表明，CEBPB表达水平与B细胞(Rho＝0.168)、M2型巨噬细胞(Rho＝0.373)、调节性T细胞(Rho＝0.348)、中性粒细胞(Rho＝0.194)和自然杀伤T细胞(Rho＝0.421)的浸润程度呈正相关。Caki-1、ACHN、786O、769P、A498细胞中CEBPB mRNA表达水平分别是HK2细胞中的(9.43±1.25)、(5.44±0.82)、(4.50±0.52)、(4.88±0.73)、(7.50±1.04)倍，CEBPB蛋白表达水平分别是HK2细胞中的(6.22±0.45)、(5.84±0.85)、(6.51±0.55)、(6.23±0.62)、(3.84±0.45)倍，差异均有统计学意义(P<0.05)。MTT实验结果显示，NC siRNA组中ACHN细胞在培养24、48、72、96 h后细胞增殖率分别为(98.4±1.7)%、(97.8±2.1)%、(101.3±1.2)%、(97.5±2.0)%，786O细胞增殖率分别为(99.0±1.4)%、(98.5±1.5)%、(97.6±1.7)%、(99.1±1.3)%；CEBPB siRNA组中，ACHN细胞在培养24、48、72、96 h后细胞增殖率分别为(68.8±5.8)%、(57.9±6.1)%、(50.9±4.6)%、(43.2±5.0)%，786O细胞增殖率分别为(79.5±6.2)%、(70.8±5.1)%、(66.8±4.9)%、(60.5±5.3)%。与NC siRNA组比较，CEBPB siRNA组ACHN、786O细胞的增殖活性明显受到抑制(P<0.05)。细胞侵袭实验结果显示，NC siRNA组ACHN、786O细胞的侵袭活性分别为对照组的(95.0±5.2)%、(97.3±4.4)%，CEBPB siRNA组ACHN、786O细胞的侵袭活性分别为对照组的(35.2±5.4)%、(26.7±3.3)%。与NC siRNA组比较，CEBPB siRNA组ACHN、786O细胞的侵袭活性明显受到抑制(P<0.05)。
CEBPB在ccRCC中高表达，且CEBPB表达水平与ccRCC患者生存预后及免疫浸润密切相关，沉默CEBPB表达显著抑制ccRCC细胞的增殖和侵袭。
版权归中华医学会所有。
未经授权，不得转载、摘编本刊文章，不得使用本刊的版式设计。
除非特别声明，本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。
免疫相关基因的筛选与鉴定目前已成为恶性肿瘤预防和治疗的研究热点之一。CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein beta, CEBPB)在肿瘤细胞的炎症反应、细胞凋亡、免疫调节及能量代谢中发挥关键作用[1]。然而，CEBPB是否在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)的发生和发展中扮演重要角色，目前研究甚少。2020年3—12月，本研究利用TCGA数据库中ccRCC患者的测序数据，分析CEBPB基因表达及其与免疫细胞浸润的关系，预测CEBPB对ccRCC患者预后的影响，并通过细胞实验探讨CEBPB对ccRCC细胞增殖和侵袭活性的影响。
