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超高效液相色谱-串联质谱联用检测血清胆汁酸谱方法的建立及初步临床应用
中华检验医学杂志, 2012,35(3)
: 253-256. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2012.03.013
摘要
目的
建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）联用方法检测血清中胆汁酸表达的方法，并初步探讨胆汁酸亚型与肥胖的关系。
方法
采用固相萃取方法处理血清标本，经UPLC HSS T3色谱柱梯度洗脱后，用负离子多反应监测模式对血清中的胆汁酸组分进行质谱检测，并根据中国国家食品药品监督管理局（SFDA）的指导原则对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、不精密度和相对回收率进行性能验证。利用UPLC-MS/MS方法检测10例单纯性肥胖者和10名健康对照者血清胆汁酸浓度，并采用秩和检验进行统计分析。
结果
UPLC-MS/MS方法可同时检测人血清中14种胆汁酸亚组分，在10～20 000 nmol/L范围内线性相关良好。其对不同亚组分的最低检出限（LOD）为0.02~7.90 nmol/L，最低定量限（LOQ）为0.07~44.20 nmol/L；其日内不精密度为0.35%～12.41%；日间不精密度为1.11%～13.04%；相对回收率为89.8%～114.6%。初步临床应用显示，单纯性肥胖者及健康对照者血清胆汁酸谱色谱图有一定差异，单纯性肥胖者血清中游离胆汁酸和结合胆汁酸浓度分别为0.49 （0.45~1.90）、1.44（0.84~3.72） μmol/L，均低于健康对照组的0.98（0.53~3.06）、1.99（0.67~2.88） μmol/L，但差异均无统计学意义（Z=-0.958、-0.801，P均>0.05）。
结论
建立的UPLC-MS/MS方法可有效分离并定量检测血清中各种胆汁酸亚型，其线性范围广、灵敏度高、精密度好，可用于临床标本游离胆汁酸和结合胆汁酸的分析测定。（中华检验医学杂志，2012，35：253-256）
引用本文:
韩建华,
苏薇,
崔巍,
等.
超高效液相色谱-串联质谱联用检测血清胆汁酸谱方法的建立及初步临床应用
[J]
. 中华检验医学杂志, 2012, 35(3)
: 253-256. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2012.03.013.
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