• 专题笔谈 •
数字PCR技术在精准分子诊断中的应用：机遇与挑战
中华检验医学杂志, 2022,45(3)
: 214-219. DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20210903-00559
摘要
数字PCR（dPCR）是近年迅速发展起来的一种绝对定量的技术，该技术将含有DNA模板的反应体系分配到大量独立的反应单元中进行PCR，根据泊松分布和统计阳性信号来计算DNA拷贝数。与传统的qPCR相比，dPCR不依赖于扩增曲线，不受扩增效率的影响，具有较高的准确度和重复性，可以实现绝对定量。本文综述了数字PCR发展历史以及在感染性疾病分子诊断、肿瘤液体活检、产前诊断等方面的应用进展，并展望了该技术的应用前景。
引用本文:
谢凤欣,
靳伟东,
田晖艳,
等.
数字PCR技术在精准分子诊断中的应用：机遇与挑战
[J]
. 中华检验医学杂志, 2022, 45(3)
: 214-219.
DOI: 10.3760/cma.j.cn114452-20210903-00559.
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聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）自20世纪80年代被发明以来，已发展成为生命科学领域最基础的分子生物学实验方法。第1代PCR技术采用琼脂糖凝胶电泳来分析PCR产物，仅适用于定性和半定量研究。20世纪90年代初出现了第2代PCR，即定量PCR（quantitative PCR，qPCR），qPCR技术由于其灵敏度高，操作简单，快速经济等优势，目前已广泛应用于临床实验室中［1］。然而，该技术依赖于用已知浓度的标准品来构建标准曲线，且反应体系中的大量抑制物会影响扩增效率，导致灵敏度受到限制。第3代数字PCR（digital PCR，dPCR）的出现解决了这一系列问题，可实现核酸模板的绝对定量、稀有突变检测、拷贝数变异、基因重排等检测，在分子生物检测领域有着巨大的应用前景［2］。
