刘艳辉; 王艳萍; 王洋; 马克涛; 司军强; 李丽

doi:10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2016.08.008

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• 论著 •

豚鼠耳蜗血管纹周细胞电生理特性的研究

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2016,51(8) : 600-605. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2016.08.008

摘要

目的

了解豚鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞的电生理特性以及周细胞膜上钾通道的类型。

方法

通过免疫荧光技术标记豚鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞相关蛋白，结合形态学特点进行单个周细胞的鉴定。利用全细胞膜片钳技术观察周细胞的基本电生理特性，并探讨给予钾通道阻断剂后周细胞外向电流的变化。

结果

通过免疫荧光技术标记周细胞结蛋白desmin，结合形态学进行鉴定，发现豚鼠耳蜗血管纹存在周细胞，消化成单个周细胞后，形态保持完好。周细胞的膜电容为(5.9±0.3)pF，膜电阻为(2.2±0.3)GΩ，膜静息电位为(－30.9±1.2)mV；当指令电压为0 mV、＋20 mV、＋40 mV、＋60 mV时，周细胞的电流密度分别为(3.2±0.7)、(10.6±1.0)、(15.7±0.9)和(21.3±1.2)pA/pF。单个周细胞膜电流I/V关系呈明显的外向整流特性，并对1 mmol/L四乙胺和1 mmol/L 4－氨基吡啶敏感。给四乙胺前后的外向电流值分别为(296.2±35.9)pA和(163.7±16.8)pA，差异具有统计学意义(n＝6, P<0.01)；给4－氨基吡啶前后的外向电流值分别为(248.7±39.8)pA和(158.0±38.0)pA，差异具有统计学意义(n＝6, P<0.05)。

结论

豚鼠耳蜗血管纹周细胞上的钾离子通道为大电导钙激活钾通道和电压依赖性钾通道。

引用本文: 刘艳辉, 王艳萍, 王洋, 等. 豚鼠耳蜗血管纹周细胞电生理特性的研究 [J] . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2016, 51(8) : 600-605. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2016.08.008.

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血管纹(striavascularis)位于蜗管(中阶)外侧壁，与螺旋韧带共同构成了耳蜗的微血管网。血管纹在维持内耳血流稳定、耳蜗内电位(内淋巴正电位)、离子转运和内淋巴平衡中起着非常重要的作用^[1]。血管纹是代谢活跃的组织，具有分泌K^＋和吸收内淋巴液电解质的功能^[2]，并产生内淋巴正电位(耳蜗内电位)，主要作用是维持耳蜗内正常的化学离子和生物电平衡，维持耳蜗正常的代谢及生理功能。血管纹由边缘细胞、中间细胞、基底细胞和纹状体空间层的毛细血管网组成^[3]。毛细血管壁由两种细胞构成，即内皮细胞和周细胞^[4,5]。周细胞是包绕在毛细血管网周围的多能干细胞^[6]，在调节血流量、血管的渗透性、血管壁的完整性以及血管壁的生成等方面起着非常重要的作用。然而，目前对内耳微循环的研究主要集中在耳蜗螺旋动脉^{[7,8,9,10,11,12]}，而对可能与耳蜗内电位形成密切相关的血管纹纹状体空间层内的毛细血管网周细胞研究却很少，其研究主要集中在形态学方面，对其生理功能，尤其是电生理学研究则更少。为此，我们于2014年6月至2015年10月通过免疫荧光标记技术结合形态学观察对豚鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞进行单个细胞的鉴定，随后利用膜片钳技术观察周细胞的电生理特性，并进一步明确其细胞膜上钾通道的类型。

贡献者信息

刘艳辉