监测与检验技术
唾液中皮质醇测定的液相色谱-质谱法
中华劳动卫生职业病杂志, 2019,37(2) : 143-146. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2019.02.014
摘要
目的

建立测定唾液中皮质醇的液相色谱-质谱检测方法。

方法

取0.5 ml唾液样品到2 ml离心管,并向其中加入过量氯化钠和1 ml乙腈,涡旋震荡3 min,15 000 r/min条件下离心10 min,取上层液体800 μl至另一离心管。样品经过真空浓缩仪浓缩并用初始流动相定容到200 μl后进仪器分析。利用外标标准曲线法对目标化合物进行定量。

结果

该方法的线性范围为0.02~5.00 ng/ml,r=0.999 9,方法检出限为0.002 ng/ml,方法定量下限为0.02 ng/ml,加标回收率为89.60%~98.60%,批内精密度为1.90%~3.30%,批间精密度为4.20%~9.00%;样品在-20 ℃条件下可放置14 d;样品中的其他内源性物质不干扰皮质醇的测定。

结论

该方法前处理简单,灵敏度高,重现性和回收率好,适用于正常人群和职业紧张人群唾液中皮质醇的定量分析。

引用本文: 刘晓东, 乔荷, 孟祥娟, 等.  唾液中皮质醇测定的液相色谱-质谱法 [J] . 中华劳动卫生职业病杂志, 2019, 37(2) : 143-146. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2019.02.014.
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皮质醇(cortrsol)是肾上腺皮质细胞分泌的高效能生物化学物质,是人体一种重要的内源性糖皮质类激素。皮质醇可以调节人体的糖类、蛋白质和脂肪的新陈代谢。此外,皮质醇还是一种重要的应激激素,当面临重大应激、抑郁或者某些系统性疾病时,人体内的皮质醇含量会显著上升[1]。国内外对职业紧张和皮质醇分泌的关系进行了研究,证实职业紧张可导致皮质醇分泌增加[2]。职业紧张可作为一种紧张信号被中枢神经系统接受和整合并传递给下丘脑,下丘脑接受刺激信号分析促肾上腺皮质激素释放激素(Corticopropin releasing homo,CRH)增多作用与垂体释放促肾上腺皮质激素(adrenocoric ofropic,ACTH),促进肾上腺皮质合成,释放皮质醇,使体内皮质醇浓度升高[3]。目前测定人体内源性皮质醇含量的生物基质主要有血液、唾液、尿液和头发。血清中的大部分的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白(corticosteroid-binding globulin,CBG)、白蛋白结合,游离皮质醇仅占3%~5%,因此血清皮质醇的测定受肝功能、妊娠等因素影响较大;24 h尿液游离皮质醇在标本的采集过程中尿液的收集、计量很困难。有研究表明唾液与血液中皮质醇含量高度相关[4],唾液皮质醇主要以游离皮质醇形式存在,且具有提取方法简便,标本易获得等优点。但由于唾液中皮醇含量较低,因而对检测设备和技术要求更高。目前皮质醇的主要分析方法有放射免疫法[5]、酶联免疫法、气相色谱质谱法[6]和液相色谱质谱法。酶联免疫法放射免疫发容易出现交叉污染和假阳性反应[7],气相色谱质谱法需要对样品进行衍化生后进样,前处理操作复杂费时且容易出现样品损失。近年来也有液相色谱质谱法检测唾液皮质醇的研究[8,9],但前处理较为复杂且成本较高。我们简化了样品前处理方法,缩短了样品上机测定的时间,利用外标法定量建立了用液相色谱质谱检测唾液中皮质醇的测定方法。

 
 
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