新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis of newborn，NEC)是早产儿的严重合并症之一，其发病机制目前仍不明确，与早产、缺氧、感染等多种因素有关。近年来由于低出生体重儿存活率的增加，NEC的发病率越来越高。NEC病情进展迅速，病死率高，即使存活者也容易出现远期并发症，如肠外营养相关性胆汁淤积、营养不良、短肠综合征、神经发育障碍、生长迟缓等^[1,2]，因此，NEC早期诊断对治疗及预后都至关重要。

目前，NEC的早期诊断主要通过临床表现及影像学结果，但有时缺乏特异性，如体温不稳、喂养不耐受、呕吐、腹胀、便血、血流灌注压低等非特异性表现，与早产儿胃肠道蠕动障碍、电解质紊乱或败血症诱发的肠梗阻有时难以鉴别。虽然在腹部X线平片上肠袢扩张、肠壁积气、门静脉积气等是NEC的特异性改变，但在早期往往不典型。近年来，一些研究表明，某些生物学标记物，如肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein，I-FABP)、肠三叶因子(intestinal trefoil factor 3，TFF3)、β-葡萄糖苷酶(beta glucosidase，CBG)、粪钙卫蛋白(fecal calprotectin，FC)等^[3]对NEC的早期诊断及指导治疗有一定作用，故本文对此进行综述。

I-FABP是细胞质内的小分子量蛋白质(14～15 000)，在肠细胞内脂质代谢过程中发挥作用，性质稳定，有高度的器官特异性，是缺血再灌注导致肠黏膜损伤的敏感性生物标记物。I-FABP正常情况下血清中含量很少，肠上皮细胞损伤后，细胞膜通透性增加，I-FABP被释放到血液循环中，在血液中半衰期为11 min，通过肾小球滤过的排泄分数为28%^[4]。

Ng等^[5]研究报道，NEC患儿血浆中I-FABP水平增高，血浆I-FABP可作为有效区分NEC和败血症/对照组的生物标记物。在20例NEC早产儿、40例败血症早产儿、40例对照组早产儿的病例对照研究中，NEC组血浆I-FABP水平显著高于败血症组和对照组，差异有统计学意义(P＝0.012)，其诊断效能的ROC曲线下面积为0.68。Schurink等^[6]在一项包含22例NEC早产儿和15例非NEC早产儿的前瞻性队列研究中，发现NEC组患儿血浆I-FABP水平显著增高，以9 ng/ml的血浆浓度作为诊断NEC的截断值，阳性似然比为5.6，同时发现I-FABP浓度在症状出现后的前8 h达到最高，然后逐渐降低。秦嘉丽等^[7]报道，当血浆I-FABP浓度>2.165 ng/ml时，其诊断NEC的敏感度和特异度高，可作为诊断NEC的判定标准。同样，尿液I-FABP对早期诊断NEC也有一定帮助，Gregory等^[8]研究发现，在NEC发生7 d内，以尿液中I-FABP>13.3 ng/ml作为诊断标准，敏感度为60%，特异度为78%，ROC曲线下面积为0.74；在NEC发生3 d内，以尿液I-FABP>13.9 ng/ml作为诊断标准，敏感度为65%，特异度为84%，ROC曲线下面积为0.80，故认为，在NEC发生3 d内获取尿液I-FABP对诊断NEC有更强的准确性。Cheng等^[9]的一项Meta分析认为I-FABP对早期诊断NEC有较好的准确性，可以减少误诊率。Coufal等^[10]研究发现，尿液I-FABP分析和影像学表现相结合，NEC诊断的敏感度和阴性预测值分别增加到91%和89%，并具有极高的特异度和阳性预测值(均为100%)。由此可见，血液和尿液中的I-FABP测定有望成为NEC的临床监测指标。

许多研究还发现，血液和尿液中的I-FABP值对评估NEC的严重程度也有一定作用。Abdel-Haie等^[3]研究报道，患儿早期(NECⅠ期)体内血浆I-FABP已显著升高，且NECⅡ～Ⅲ期组的血浆I-FABP浓度明显高于NECⅠ期组，差异有统计学意义(P<0.05)，结果表明血浆I-FABP浓度与NEC的严重程度有一定相关性；Schurink等^[6]发现，在NEC患儿中，需要手术干预患儿的血浆I-FABP值比非手术干预组高很多，并建议以血浆19 ng/ml和尿232 ng/ml水平作为截断值来判断NEC早产儿是否需要手术干预，阳性似然比分别是10和11。Heida等^[11]的研究证实，血浆及尿液中的I-FABP可以评估进展期NEC患儿的肠坏死情况，从而可以确定最佳的手术干预时间，早期手术干预可以避免病情进一步恶化，若不能及时进行手术，可诱发败血症甚至造成患儿死亡。Ng等^[5]同样发现血浆I-FABP水平可以反映NEC肠道损伤的严重程度，死亡患儿明显高于存活患儿。Simões等^[12]的动物实验结果证实，I-FABP是肠道缺血性损伤的有效生物标记物，与肠缺血时间及肠损伤程度相关。

Schurink等^[13]研究证实，血浆与尿液中的I-FABP值具有很强的关联性(r＝0.8，P<0.001)，可单独应用血浆或尿液的I-FABP来早期诊断NEC。但需注意的是，血液检测更易获得结果，新生儿期24 h尿样本收集比较困难，特别是病情严重导致无尿时，就无法采用尿液分析。此外，当肠壁全层坏死、供应肠段无血供时，几乎没有I-FABP被释放到血流中，表明正常或接近正常的I-FABP作为单独指标不能评估NEC的严重程度。另外，Reisinger等^[14]研究发现，尿液I-FABP水平有助于对NEC患儿最佳开奶时机进行判断。但是，由于目前试验诊断的检测样本数量较少，不足以证明I-FABP在临床应用的价值，因此还有待于进一步研究验证。

TFF3是三叶因子家族的一员，能够减轻多种炎性因子介导的肠黏膜损伤，在肠道自我保护和减轻肠道炎性损伤中发挥了重要作用。Yi等^[15]动物实验证实，TFF3可减轻NEC小鼠肠道损伤。但对于NEC早产儿TFF3水平的相关报道甚少，Ng等^[5]发现LIT评分系统[肝脂肪酸结合蛋白(liver fatty acid binding protein，L-FABP)、I-FABP、TFF3]可用于NEC严重程度的评估，在NEC组中LIT评分显著高于对照组，若以4.5作为评分截断值可判断NEC患儿是否需要手术干预(P≤0.02)，其敏感度和特异度分别为83%和100%；以6作为LIT评分截断值可判断NEC患儿能否存活，其敏感度和特异度分别为78%和91%。仅在NEC组中，I-FABP、L-FABP、TFF3值呈正相关(r＝0.65，P<0.005)。与I-FABP、L-FABP不同，TFF3的产生不会停止，说明动态检测TFF3有可能预测NEC的病情进展。

CBG属于GH1水解酶家族，代谢黄酮苷具有解毒作用，主要定位于十二指肠、空肠、回肠和盲肠，其表达异常对肠道的缺血损伤具有特异性。大量动物实验表明，血清CBG浓度在肠组织缺血损伤早期即迅速上升，且随着缺血时间的增加进一步上升，认为CBG可以作为肠缺血损伤的早期生化指标。在肠缺血情况下，血清CBG值迅速上升，其他脏器表达CBG并不明显提高，提示CBG有较好的组织特异性，同时发现血清CBG的升高发生在严重肠道损伤之前^[16]。Gómez-Chaparro等^[16]研究发现，NEC组(13例)血清CBG浓度[(26.4±12.4)mU/mg]高于非NEC组(128例)[(11.0±6.6)mU/mg]，以15.6 mU/mg作为截断值区分是否为NEC患儿，具有84.6%的敏感性和85.9%的特异性，阳性预测值37.9%，阴性预测值98.2%，认为血清CBG是早期诊断NEC的较好生物标记物。Chen等^[17]和Benkoe等^[18]同样发现在NEC患儿中CBG值显著增加。血清CBG检测方法简单，价格低，易于广泛应用，但目前关于CBG的报道较少，仍需更多大规模研究进一步证实。

FC是由钙和锌结合而成的36 000蛋白质，是急性炎性细胞活化的标记物^[19]。Cury等^[20]和Terrin等^[21]研究发现，当罹患各系统炎症时，血浆钙卫蛋白(serum calprotectin，SC)浓度升高，可达正常水平的5～40倍，与性别有关，不具备肠道特异性。Aydemir等^[22]研究发现当肠道有炎症时，中性粒细胞活化后穿过肠壁进入肠腔，使粪便中FC水平上升，且与中性粒细胞排出量呈正相关，FC含量大约是SC含量的6倍，与性别无关。Mccann等^[23]研究提出SC与FC相关性不强，且SC的临床实用性较差。除此之外，FC可对抗肠道细菌和蛋白酶的降解，且有抗热性，在粪便中能保持稳定大约7 d，表明粪便中的FC结构非常稳定，其含量可用于诊断肠道炎症及肠道上皮损伤程度^[19]。

Yoon等^[19]采集了154份早产儿粪便，经检测研究发现，NEC组FC水平明显高于非NEC组FC水平，差异有统计学意义(P<0.05)；Aydemir等^[24]研究发现，Ⅲ期NEC组的粪便FC水平比Ⅱ期NEC组显著升高。Reisinger等^[25]报道62例临床疑似NEC的患儿，其中29例最终诊断为NEC，其FC水平显著高于非NEC组(402.2比79.6 μg/g，P＝0.001)，联合尿I-FABP和FC两项指标可以增加诊断NEC的准确性，敏感度为94%，特异度为79%，阳性似然比为4.48，阴性似然比为0.08。Terrin等^[26]建议，当FC临界值定为3.0 mg/ml时，可以区分NEC需内科或外科治疗，其敏感度为100%，特异度为96.4%。Campeotto等^[27]建议，以粪便FC>363 μg/g和>636 μg/g作为区别轻度和重度肠病的临界值。上述研究表明，FC可以作为早期诊断NEC的生物标记物，连续监测FC对NEC病情进展及预后情况的评估可能有一定帮助。FC样本收集简单无创，价格便宜，重复性好，测定粪便量少，可灵敏地反映肠道局部炎症程度，是NEC早期诊断的良好生物标记物。但也有学者提出，FC变异度高，在不同研究有不同诊断界值，因此，难以用统一的标准作为临床的早期诊断指标。

Yoon等^[19]发现，当胎龄<26周时，FC水平与生后日龄呈正向线性关系(r＝0.45，P＝0.00)，当26周≤胎龄<30周时，FC水平与生后日龄呈负向线性关系(r＝－0.31，P＝0.03)，当胎龄≥30周时，FC水平与生后日龄无关联；Rougé等^[28]研究包括了47例极低出生体重儿，胎龄27～29周，共147份粪便，最终得出FC水平与胎龄呈正相关(r＝0.34，P＝0.001)，与生后日龄呈正相关(r＝0.17，P＝0.036)。Campeotto等^[27]认为FC水平与生后日龄没有任何关系。Josefsson等^[29]认为FC水平在生后第1周内下降，生后1～8周内上升，且FC水平与胎龄无关。因此，目前有关新生儿期FC水平与胎龄、日龄间的相互关系有待于进一步明确。

还有许多非特异性的炎性反应标记物，如C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)、降钙素原(procalcitonin，PCT)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A protein，SAA)、白细胞介素-8(interleukin-8，IL-8)等，在NEC发生时也有升高，但难与其他感染性疾病相鉴别，往往需要多种指标综合评估。