论著
长链非编码RNA XIST靶向miR-101/EZH2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响
中华胰腺病杂志, 2020,20(3) : 200-206. DOI: 10.3760/cma.j.cn115667-20191022-00094
摘要
目的

探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录本(XIST)对胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移能力的影响,明确lncRNA XIST与miR-101/zeste基因增强子同源物2(EZH2)的靶向关系。

方法

收集2010年7月至2018年9月间浙江省嘉兴市第一医院行手术切除并经病理学确诊的90例胰腺癌及其对应的癌旁正常组织;选取PANC1细胞将其分为sh-XIST组、sh-control组、miR-control组和miR-101组。采用荧光定量PCR法检测胰腺癌组织和各组PANC1细胞lncRNA XIST、miR-101的表达,分析lncRNA XIST和miR-101的表达与肿瘤临床病理参数的关系。采用CCK-8法和Transwell小室检测各组PANC1细胞的增殖和迁移能力,蛋白质免疫印迹法检测各组PANC1细胞的EZH2表达水平。将各组PANC1细胞以3×106个/100 μl密度分别接种于Balb/c裸鼠,检测种植瘤体积。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA XIST与miR-101及其下游靶基因EZH2的关系。

结果

与癌旁组织比,胰腺癌组织lncRNA XIST表达量显著上调(2.89±0.42比1.12±0.22,P<0.05),miR-101水平显著下调(0.32±0.12比1.25±0.22),差异均有统计学意义(P值均<0.05)。胰腺癌的分化程度越高、TNM分期越高、淋巴结转移的癌组织lncRNA XIST水平显著升高,miR-101水平显著降低。sh-XIST组PANC1细胞lncRNA XIST表达水平较sh-control组显著下调(0.34±0.18比1.21±0.27),miR-101组PANC1细胞miR-101表达水平较miR-control组显著上调(2.94±0.31比1.54±0.29),差异均有统计学意义(P值均<0.05)。培养72 h的sh-control组、sh-XIST组、miR-control组和miR-101组450 nm处吸光度值(A450值)分别为1.98±0.24、1.21±0.20、1.87±0.21、1.11±0.17,穿膜细胞数分别为(74.25±6.79)、(29.11±5.17)、(61.27±5.19)、(20.47±4.58)个细胞/200倍视野,sh-XIST组较sh-control组、miR-101组较miR-control组细胞增殖活力和迁移能力均显著下降,种植瘤生长明显缓慢,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。

结论

lncRNA XIST可靶向结合miR-101/EZH2调节胰腺癌PANC1细胞的增殖和迁移能力,促进胰腺癌的发生和发展。

引用本文: 闵捷, 曹丽莉, 沈彬彬, 等.  长链非编码RNA XIST靶向miR-101/EZH2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响 [J] . 中华胰腺病杂志, 2020, 20(3) : 200-206. DOI: 10.3760/cma.j.cn115667-20191022-00094.
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非编码RNA包括长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)和微小RNA (micro RNA,miR),这两种RNA通过不同的分子机制相互作用参与肿瘤的发生[1]。研究证实,lncRNA X染色体失活特异转录本(X-inactive specific transcript,XIST)作为癌基因,在肺腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌和胶质瘤组织中高表达,促进肿瘤的发生、发展和转移[2,3,4,5,6],而miR-101则作为抑癌基因在胰腺癌组织中呈低表达,可通过靶向抑制Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2(rhoassociated coiled coil forming protein kinas,ROCK2)减弱胰腺癌细胞的侵袭能力[7]。zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog2, EZH2)是miR-101的下游靶向基因,与miR-101的结合靶点为3′-UTR区,其存在7个互补碱基。既往研究报道[8],lncRNA XIST和miR-101在宫颈癌中的表达呈负相关,认为lncRNA XIST可通过海绵样吸附作用,竞争性与miR-101结合,抑制miR-101的调控作用。然而有关lncRNA XIST与miR-101两者相互作用对胰腺癌的影响报道较少。本研究旨在探讨lncRNA XIST与miR-101/EZH2对胰腺癌细胞增殖、迁移的影响及其与临床病理特征的关系,以期为胰腺癌的早期诊断和治疗靶点提供参考。

 
 
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