生物技术
猪肝脱细胞基质制备方法研究
中华生物医学工程杂志, 2022,28(5) : 528-533. DOI: 10.3760/cma.j.cn115668-20220119-00012
摘要
目的

对比分析不同方法制备的猪肝脱细胞基质中蛋白的保留情况,进一步优化制备工艺。

方法

分别采用聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、十二烷基硫酸钠(SDS)两种表面活性剂并结合胰酶酶解等手段制备猪肝ECM。再以H&E染色、免疫组化、生物质谱分析等检测方法对比分析两种ECM的成分及含量,进而优化ECM的制备工艺并探讨其中的机制。

结果

Triton X-100和SDS两组都可以制备符合国际标准的ECM,其中Triton X-100组对胶原蛋白和生长因子的保留优于SDS组;但GAG流失较多。

结论

综合运用胰蛋白酶+氨水+Triton X-100的脱细胞策略可以制备符合国际标准的ECM,同时减少了ECM蛋白的流失。

引用本文: 赵超尘, 邬杏连, 周俊晶. 猪肝脱细胞基质制备方法研究 [J] . 中华生物医学工程杂志, 2022, 28(5) : 528-533. DOI: 10.3760/cma.j.cn115668-20220119-00012.
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细胞外基质(ECM)是细胞分泌到细胞外的成分复杂的复合物,包含胶原蛋白、糖胺聚糖(GAG)、弹性蛋白、纤维连接蛋白等[1]。这些蛋白在细胞的粘附、增殖过程中发挥重要作用,同时对细胞的功能表达也有很大的影响。因此ECM在组织工程中的地位日趋重要[2],在细胞支架、组织修复等多个方向都发挥巨大的作用。将组织中细胞成分去除后获取的细胞外基质又称为脱细胞基质。去除细胞的方法多种多样[3],但核心目标不外乎清除细胞成分和保留ECM蛋白两方面。本研究对比分析以Triton X-100和SDS为核心的两种脱细胞方案的脱细胞效果,进一步优化脱细胞基质的加工流程。

 
 
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