• 实验研究 •
PLK1基因siRNA的构建及对甲状腺未分化癌细胞增殖和凋亡的影响
中华内分泌外科杂志, 2011,05(02)
: 76-79. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-6090.2011.02.002
摘要
目的 构建保罗样激酶-1(PLK1)基因小干扰RNA(siRNA),并观察其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计合成5个PLK1 siRNA(S1、S2、S3、S4、S5),转染人甲状腺癌ARO细胞后,采用实时定量RT-PCR方法筛选下调PLK1 mRNA效果最好的siRNA;然后以该siRNA转染ARO细胞后,分别以实时定量RT-PCR和Western blot检测各组细胞PLK1基因表达情况;以MTT法检测对各组细胞增殖的影响;分别以caspase-3活性和TUNEL方法明确甲状腺癌细胞凋亡情况.结果 5个siRNA均明显下调PLK1 mRNA水平,以S4效果最好,抑制率达91.5%.MTr结果显示,S4 siRNA转染对甲状腺癌细胞增殖均有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05).与对照组比较,S4 siRNA转染组癌细胞caspase-3活性明显升高,且呈浓度和时间依赖性(r=0.919;r=0.957);TUNEL结果显示,S4 siRNA转染组出现明显的凋亡现象,且呈浓度依赖性(r=0.932).结论 PLK1基因在甲状腺未分化癌细胞增殖中具有重要的调控作用.PLK1 siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖,诱导凋亡是其重要机制之一。
引用本文:
柳迎昭,
俞力,
龚丹丹,
等.
PLK1基因siRNA的构建及对甲状腺未分化癌细胞增殖和凋亡的影响
[J]
. 中华内分泌外科杂志, 2011, 05(02)
: 76-79. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-6090.2011.02.002.
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